原代細胞取材的基本要求和注意事項

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，是進行細胞培養的*步，若取材不當，將會直接影響細胞的體外培養，現將取材的基本要求和注意事項敘述如下：

一、取材的基本要求

　　（1）取材要注意新鮮和保鮮 新鮮組織易于培養成功，取材時應盡量在4~6h內能制作成細胞，盡快入箱培養，若不能即時培養，應將組織浸泡于培養液內，于4℃存放。若組織塊較大，應在清除表面血、壞死組織、脂肪和結締組織后，切碎于培養液內4℃存放，但時間不能超過24h。對于已切碎的組織或血液、淋巴組織應加入含10%二甲基亞砜的培養基，按細胞凍存方式于液氮中冷凍保存。

　　（2）取材應嚴格無菌 所取標本材料應在無菌條件下進行，為了確保無菌，對所取材料若疑有污染的可能，應將所取組織在含高濃度抗菌素（400單位/mL）甚至加入適量的兩性霉素B或10%達克寧液的培養液內于4℃下存放2小時以上，再用PBS洗2~3次，以確保所取材料無菌。要用無菌包裝的器皿或事先消毒好的帶少許培養液（內含400單位/mL抗菌素）的小瓶等便于攜帶的物品來取材，所取材料應避免接觸有毒有害的化學物質，如碘、汞等。

　　（3）取材和原代細胞制作時，要用鋒利的器械，如手術刀或剃須刀片切碎組織，盡可能減少對細胞的機械損傷。