原代細胞活性是判斷體外培養細胞在某些條件下是否能正常生長的重要指標,如藥物處理、放射性或紫外線照射、培養條件變化等。目前常用的方法有很多,如有臺盼藍染色法、克隆(集落)形成法、H放射性同位素摻入法、MTT法等。本文總結了一些常用的細胞活性檢測方法的原理、特點，并對比了各自的優缺點。
一、染色計數法
1. 化學染色法
染色計數法是細胞培養中檢查細胞死活zui常用的方法，直接利用死細胞和活細胞對染料的不同親和力，檢查細胞活性，能在光學顯微鏡下觀察到染色結果。可分為兩類：死細胞著色法和活細胞著色法。使死細胞著色的常用染料有臺盼藍、苯胺黑、伊紅Y。能使活細胞著色的常用染料有結晶紫、亞甲基藍、甲苯胺藍等。其中zui常用的是臺盼藍染色法。細胞損傷或死亡時，臺盼藍可穿透變性的細胞膜，與解體的DNA結合，使其著色，而活細胞能阻止染料進入細胞內，故可以鑒別死細胞與活細胞。通過細胞計數可得出細胞的存活率。

本染色法方便實用，價格低廉，操作簡單。但是臺盼藍染色時，時間不宜過長，否則部分活細胞也會著色，會干擾計數。而且，細胞沒有經過固定，形態不清晰。

2. 熒光染色法
一些熒光染料對死細胞和活細胞也有不同的作用效果，利用熒光顯微鏡檢測細胞活性。如碘化丙啶（PI），被活細胞排斥但能穿透正在死亡或已經死亡細胞的細胞膜，因此活細胞不被染料上色，只有死細胞或凋亡細胞才能被染上紅色。吖啶橙（AO）能透過質膜完整的細胞，嵌入細胞核DNA，使之發出明亮的綠色熒光。溴乙錠（EB）僅能透過胞膜受損的細胞，嵌入核DNA，發橘紅色熒光。也可應用AO-EB雙染法鑒定細胞死活。

原代細胞這種檢測方法相比傳統的染料，具有靈敏度高，操作簡便，結果容易分辨等特點，而且利用雙染法還可以分辨活細胞、凋亡早期細胞、凋亡晚期細胞、死亡細胞。在細胞凋亡的檢測上有很廣泛的應用。

缺點在于，要求特殊的儀器進行檢測，如熒光顯微鏡、激光掃描共聚焦顯微鏡或流式細胞儀。而且通過熒光染料具有毒性，操作時需要帶手套。
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1L    溫和剝離緩沖液        GENTLE REVIEW STRIPPING BUFFER        
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100G    十八水硫酸鋁        ALUMINUM SULFATE OCTADECAHYDRATE        7411-49-6
原代細胞