商品介紹：

公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

相關產(chǎn)品：

Recombinant Human Rantes宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human KIF5A宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human STOML2宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human ETV5宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   
操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Phospho-Doublecortin (Ser47)產(chǎn)品名稱: 雙皮質su抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse

DNA Ligase III產(chǎn)品名稱: DNA連接mei3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Rabbit

應用類型: Other英文名稱: ERK2英文別名: Mitogen-Activated Protein Kinase 1;

NET1產(chǎn)品名稱: 去甲腎上su轉運蛋白/神經(jīng)遞質去甲腎上su轉運體抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

應用類型: Other英文名稱: Villin英文別名: VIL; VIL1; Villin 1; Villin-1; Villin1; D2S1471; OTTHUMP00000164145; VILI_HUMAN.

CYP3A1產(chǎn)品名稱: 細YP3A1抗體交叉反應: Rat

Cyp2J3產(chǎn)品名稱: 細胞色suP450Ⅱj3抗體交叉反應: Mouse, Rat

Phospho-PERK (Thr980)產(chǎn)品名稱: 蛋白激mei樣內質網(wǎng)激mei抗體產(chǎn)品別名: p-PERK(Thr982); PERK(Phospho Thr982); PERK(Phospho T982);

應用類型: Other英文名稱: Calretinin英文別名: 29 kDa calbindin; CAB 29; CAB29; CAL 2; CAL2; CALB 2; CALB2; Calbindin 2 29kDa; Calbindin 2; Calbindin D29K; Calbindin2; CR; CALB2_HUMAN; Calretinin.

Phospho-Bad (Ser134)產(chǎn)品名稱: 相關死亡促進因子抗體交叉反應: Human   

羧肽酶O(CPO)重組蛋白人血色病蛋白(HFE)ELISA試劑盒HFE血色病蛋白elisa kitHuman Hemochromatosis(HFE)ELISA Kit

人血紅蛋白μ(HBμ)ELISA試劑盒HBμ血紅蛋白μELISA試劑盒Human Hemoglobin Mu(HBm)ELISA Kit

人血紅蛋白θ1(HBθ1)ELISA試劑盒HBθ1血紅蛋白θ1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Hemoglobin Theta 1(HBq1)ELISA Kit

人血紅蛋白ζ(HBζ)ELISA試劑盒HBζ血紅蛋白ζelisa檢測試劑盒Human Hemoglobin Zeta(HBz)ELISA Kit

人血紅蛋白ε1(HBε1)ELISA試劑盒HBε1血紅蛋白ε1elisa kitHuman Hemoglobin Epsilon 1(HBe1)ELISA Kit  
注意事項：

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。

2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作