產(chǎn)品名稱(chēng)：雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測(cè)試方法:微量法、可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6675

測(cè)定意義

強(qiáng)堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物；紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無(wú)關(guān)，故可用來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)含量。該方法測(cè)定范圍為1~10mg蛋白質(zhì)，適用于蛋白質(zhì)濃度高的樣品，尤其是動(dòng)物材料。

試劑組成和配置

1、雙縮脲試劑×1瓶，4℃保存；

2、10mg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白×1支，-20℃保存；

3、標(biāo)準(zhǔn)蛋白配制：取10mg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白100μl加雙蒸水100μl，即得5mg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明！

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過(guò)濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿(mǎn)意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

Anti-P38 MAPK/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記原活化蛋白激酶p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

rec Protein G/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的重組蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體抗體 Anti-C-Met/HGFR 0.1ml

Rabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml

Phospho-FoxO3a (Ser318 + Ser321) 英文名稱(chēng)： 磷酸化叉頭蛋白3A抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh PILR beta 細(xì)胞表面受體PILRβ抗體 規(guī)格 0.2ml

rec Protein G/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的重組蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

HPV18 E6 人類(lèi)狀瘤病毒18抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-ABCB6 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-CHK2 (Thr68) 磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml

兔抗豚鼠IgG血清 0.5ml 國(guó)產(chǎn)

WNT7A 英文名稱(chēng)： 原癌基因wnt7a蛋白抗體 0.1ml

Phospho-DOK2 (Tyr142) 英文名稱(chēng)： 磷酸化D酪酸激酶衰減蛋白2抗體 0.1ml

Anti-ABCB6 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

phospho-SHC (Tyr427) 英文名稱(chēng)： 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml

EBNA 3B 英文名稱(chēng)： EB病毒核抗原-3B抗體 0.2ml

CD40L抗體 Anti-CD40L 0.1ml

Mouse Anti-human VEGF/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗人VEGF單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GNA12(Ser68) 磷酸化鳥(niǎo)苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體 規(guī)格 0.1ml

Cdc34 peptide 細(xì)胞周期調(diào)控因子34抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)二甲氯(標(biāo)準(zhǔn)品)羅格列酮組織AURORA-A酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

油酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.0%(GC))草酸艾司西酞普蘭AURORA-B酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

烯酸甲酯（MA）(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))依西美坦組織AURORA-B酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

丁酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC),用于環(huán)境分析)依西美坦中間體（雄烯二酮）AURORA-C酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

3-甲基膽蒽標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 ng/μL ,基體：乙)鹽酸曲美他組織AURORA-C酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

異丁(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC))孟魯司特鈉ERK1/2酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

乙酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9%（GC))S-孟魯司特鈉組織ERK1/2酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

二乙二二甲(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.7%(GC))鹽酸氨酮戊酸P38a酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）