蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！

商品介紹：

相關(guān)產(chǎn)品：

Janus激酶2(JAK2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Janus Kinase 2 (JAK2)Homo sapiens (Human，人)

Janus激酶3(JAK3)活性蛋白英文名稱：Active Janus Kinase 3 (JAK3)Homo sapiens (Human，人)

Janus激酶3(JAK3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Janus Kinase 3 (JAK3)Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

K-乙酰轉(zhuǎn)移酶2A(KAT2A)重組蛋白英文名稱：Recombinant K-Acetyltransferase 2A (KAT2A)Homo sapiens (Human，人)   

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng)：

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。

2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時(shí)間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí)。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí)，有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù)，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時(shí)請小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作 
HBeAg(2E6)產(chǎn)品名稱: 人乙型e抗原單克隆（檢測）抗體標(biāo)記: Unconjugated

Nucleoplasmin 3產(chǎn)品名稱: 核仁磷suan蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

應(yīng)用類型: Other英文名稱: Histone H2A (Acetyl-Lys9)英文別名: Acetyl-Histone H2A (Lys9); H2AK9ac; H2a 615; H2A; H2A GL101; H2A histone family member A; H2A.1; H2A.2; H2A/a; H2A/m; H2A/O; H2A/q; H2AFA; H2AFE; H2AFL; H2AFM; H2AFO; H2AFQ; HIST1H2AE; HIST1H2AJ antibody HIST2H2AA; HIST2H2AA3; HIST2H2AB; HIST2H2AC; Histone 1 H2ae; Histone 2 H2aa3; Histone 2 H2ab; Histone 2 H2ac; Histone H2A type 1 B; Histone H2A type 1 C; Histone H2A type 1 E; Histone H2A type 1 J; MGC74460.

TBRG1產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)化生長因子β調(diào)節(jié)蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

Ferritin Heavy Chain產(chǎn)品名稱: 重鏈抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

GNB1L產(chǎn)品名稱: G蛋白β樣蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Zebrafish

katanin p80產(chǎn)品名稱: 劍蛋白p80抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse, Rabbit

C9orf103產(chǎn)品名稱: 9號染色體開放閱讀框103抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse

KRT84產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞角蛋白84抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse, Sheep

ARSI產(chǎn)品名稱: 芳香基酯mei家族蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep   

N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8樣蛋白(NAT8L)重組蛋白人肌微管鈣黏附蛋白(CDH15)ELISA試劑盒CDH15肌微管鈣黏附蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Cadherin, Myotubule(CDH15)ELISA Kit

人肌特異性烯醇化mei(MSE)ELISA試劑盒MSE肌特異性烯醇化meielisa檢測試劑盒Human Enolase, Muscle Specific(MSE)ELISA Kit

人肌糖ζ(SGCζ)ELISA試劑盒SGCζ肌糖ζelisa kitHuman Sarcoglycan Zeta(SGCz)ELISA Kit

人肌糖ε(SGCε)ELISA試劑盒SGCε肌糖εELISA試劑盒Human Sarcoglycan Epsilon(SGCe)ELISA Kit

人肌糖δ(SGCδ)ELISA試劑盒SGCδ肌糖δelisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Sarcoglycan Delta(SGCd)ELISA Kit