商品介紹：

公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

相關(guān)產(chǎn)品：

賴(lài)氨酸特異性去甲基化酶4C(KDM4C)重組蛋白R(shí)ecombinant RNA Exonuclease 2 Homolog (REXO2)

賴(lài)氨酸特異性去甲基化酶4A(KDM4A)重組蛋白R(shí)ecombinant Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1 (RXFP1)

賴(lài)氨酸特異性去甲基化酶3B(KDM3B)重組蛋白R(shí)ecombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)

賴(lài)氨酸tRNA合成酶(KARS)重組蛋白R(shí)ecombinant Ribonuclease A13 (RNASE13)   
操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

MMP15產(chǎn)品名稱(chēng): 基質(zhì)金屬蛋白mei-15抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

FGF1產(chǎn)品名稱(chēng): suan性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit

SLC7A3產(chǎn)品名稱(chēng): 溶質(zhì)載體家族蛋白7成員3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep

Mouse CD25(IL2RA)/PE-Cy7產(chǎn)品名稱(chēng): PE-Cy7標(biāo)記小鼠CD25單克隆抗體交叉反應(yīng): Mouse

BAG6產(chǎn)品名稱(chēng): Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

DUX4L4產(chǎn)品名稱(chēng): 雙同源盒蛋白4樣蛋白4交叉反應(yīng): Human

CCRK產(chǎn)品名稱(chēng): 細(xì)胞周期相關(guān)激mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

應(yīng)用類(lèi)型: IVD原料???英文名稱(chēng): Azurocidin/HBP英文別名: Azu 1; Azu1; CAP37; CAP7_HUMAN; cationic antimicrobial protein 37; Cationic antimicrobial protein CAP37; HBP; Heparin binding protein; Heparin-binding protein; HUMAZUR.

CCDC106產(chǎn)品名稱(chēng): 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白106抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse

MTM1產(chǎn)品名稱(chēng): 肌微管su1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Rabbit   

NADP依賴(lài)性蘋(píng)果酶2(ME2)活性蛋白大鼠磷suan化胰島su受體(phosphorylated ISR)ELISA試劑盒phosphorylated ISR磷suan化胰島su受體elisamei聯(lián)免疫試劑盒 Rat phosphorylated insulin receptor (phosphorylated ISR) ELISA kit

大鼠磷suan化Tau蛋白(pMAPT/pTAU)ELISA試劑盒pMAPT/pTAU磷suan化Tau蛋白elisa檢測(cè)試劑盒Rat phosphorylated microtubule-associated protein tau,pMAPT/pTAU ELISA kit

大鼠磷蛋白關(guān)聯(lián)鞘糖脂微區(qū)1(PAG1)ELISA試劑盒PAG1磷蛋白關(guān)聯(lián)鞘糖脂微區(qū)1elisa kitRat PAG1 ELISA kit

大鼠粒細(xì)胞克隆刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒G-CSF粒細(xì)胞克隆刺激因子ELISA試劑盒Rat G-CSF ELISA Kit

大鼠酪氨suan蛋白激meiJAK3(Jak3)ELISA試劑盒Jak3酪氨suan蛋白激meiJAK3elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat tyrosine-protein kinase JAK3,Jak3 ELISA kit  
注意事項(xiàng)：

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類(lèi)以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。

2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆，切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí)，有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù)，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作