產(chǎn)品名稱：小鼠前列腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10298

細(xì)胞生長實驗 ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
mucin4/Muc4/FITC 熒光素標(biāo)記粘蛋白-4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

 ULBP1/N2DL1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠UL16結(jié)合蛋白1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體  ACEI 0.1ml

Mouse  rabbit IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml

Galactocerebroside 英文名稱： 半乳糖腦苷脂酶抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh PRRSV-GP5 豬藍(lán)耳病病毒GP5蛋白抗體 規(guī)格 1ml

 ULBP1/N2DL1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠UL16結(jié)合蛋白1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

NPC(Human nasopharyngeal carcinoma) ELISA Kit 人鼻咽癌Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 HDAC11 組蛋白去乙酰化酶11抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MEI-1 減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

CHAc(Human choline acetylase) ELISA Kit 人膽堿乙酰化酶 96T

ROR beta 英文名稱： 維相關(guān)孤兒受體β抗體 0.2ml

C1ORF190 英文名稱： 1號染色體開放閱讀框190抗體 0.2ml

 HDAC11 組蛋白去乙酰化酶11抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse  Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml

GLRA4 英文名稱： 甘酸受體α4抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ABCB6 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體 規(guī)格 0.1ml

 Phospho-MYL2 (Ser19) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化肌球蛋白輕鏈2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rab24 ras基因相關(guān)蛋白Rab24抗體 規(guī)格 0.2ml

 TrK A/FITC 熒光素標(biāo)記酪激酶A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
小鼠前列腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基地生蘭（terrestrial）移植維護培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑地紅霉素

地生蘭（terrestrial）增殖培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑乳果糖

蘭花Knudson培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑代乙酰

蘭花Vacin & Went培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑鹽酸三乙

蘭花Lndeman培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑聚乙二醇1450

蘭花Malmgen培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑焦碳酸二乙酯

蘭花Ichihashi培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑磷酸銨

大鼠腎上腺總RNA20微克巖白菜素

大鼠腎上腺髓質(zhì)素基因引物對2 OD木栓酮

大鼠腎上腺髓質(zhì)素（AM）基因cDNA產(chǎn)物50微克蓮心堿高氯酸鹽

純化大鼠腎上腺髓質(zhì)素（AM）基因重組表達(dá)載體（pcDNA-AM）10微克1-羥基-3，4，5-氧基山酮

純化大鼠腎上腺髓質(zhì)素（AM）基因重組表達(dá)載體（pcDNA-AM）測序引物對2 OD相思子堿

大鼠腎上腺髓質(zhì)素（AM）基因重組表達(dá)載體（pcDNA-AM）1毫升柳穿魚黃素

感受態(tài)菌DH-5α絡(luò)石苷

純化大鼠腎上腺髓質(zhì)素（AM）基因重組表達(dá)載體（pCMV5-AM）10微克荊芥