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產(chǎn)品名稱：苯丙氨酸解氨酶(PAL)試劑盒品牌

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測(cè)試方法:微量法、可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6709

測(cè)定意義

PAL（EC4. 3 1 5）廣泛存在于各種植物和少數(shù)微生物中，是植物體內(nèi)苯丙烷類代謝的關(guān)鍵酶，與一些重要的次生物質(zhì)如木質(zhì)素、異黃酮類植保素、黃酮類色素等合成密切相關(guān)，在植物正常生長(zhǎng)發(fā)育和抵御病菌侵害過(guò)程中起重要作用。

測(cè)定原理：

PAL催化L-苯丙氨酸裂解為反式肉桂酸和氨，反式肉桂酸在290nm處有最大吸收值，通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率計(jì)算PAL活性。

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過(guò)濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

Anti-phospho-STAT5a(pThr694)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse Anti-rabbit IgG 小鼠抗兔IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗體 Anti-GCS 0.1ml

Donkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml

FKBP10 英文名稱： 肽基脯酰順?lè)串悩?gòu)酶FKBP10抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Smad3(Ser213) 磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse Anti-rabbit IgG 小鼠抗兔IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

IL-10 人白介素-10Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CHK1 細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NUP160 核孔蛋白NUP160抗體 規(guī)格 0.2ml

Activiated Biotin 活化生物素 5mg

Tumstatin 英文名稱： 抑素抗體 0.2ml

Ceruloplasmin 英文名稱： 銅藍(lán)蛋白抗體 0.1ml

Anti-CHK1 細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

S6PDH 英文名稱： 6-磷酸山梨醇脫氫酶抗體 0.2ml

E1 Ubiquitin Activating Enzyme 英文名稱： 泛素激活酶E1抗體 0.1ml

蛋白激酶C抗體 Anti-PKC 0.1ml

Anti-STAT5/FITC 熒光素標(biāo)記信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-mTOR (Tyr) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

ANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1) 血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
苯丙氨酸解氨酶(PAL)試劑盒品牌抑霉唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)血竭素高氯酸鹽組織RCT酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

吡蟲(chóng)啉標(biāo)準(zhǔn)溶液(1mg/ml,溶劑：甲)10-羥基-2-癸烯酸ROS酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

稻瘟靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)酸棗仁皂苷 B組織ROS酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=5%)牛磺膽酸鈉RSE酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=5～3%,酮)牛磺熊去氧膽酸鈉組織RSE酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

殺螟硫磷(標(biāo)準(zhǔn)品)鹽酸川芎SRCN1酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

鄰苯二甲酸二甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)紅景天苷組織SRCN1酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

對(duì)二氯苯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.8%(GC))牛蒡子苷SRCN2酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。