蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！

商品介紹：

相關(guān)產(chǎn)品：

乳酸脫氫酶A(LDHA)重組蛋白英文名稱：Recombinant Lactate Dehydrogenase A (LDHA)Homo sapiens (Human，人)

乳酸脫氫酶B(LDHB)重組蛋白英文名稱：Recombinant Lactate Dehydrogenase B (LDHB)Homo sapiens (Human，人)

乳酸脫氫酶C(LDHC)重組蛋白英文名稱：Recombinant Lactate Dehydrogenase C (LDHC)Homo sapiens (Human，人)

乳酸脫氫酶D(LDHD)重組蛋白英文名稱：Recombinant Lactate Dehydrogenase D (LDHD)Homo sapiens (Human，人)   

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

注意事項：

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復(fù)，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作 
應(yīng)用類型: Methylated英文名稱: Valine標記: Unconjugated

CARD9產(chǎn)品名稱: CARD9抗體交叉反應(yīng): Human, Dog, Horse

human CD45/Cy7產(chǎn)品名稱: Cy7標記小鼠抗人CD45單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian

Alpha 1 microglobulin產(chǎn)品名稱: α1微球蛋白單克隆抗體交叉反應(yīng): Human

CDCREL產(chǎn)品名稱: 細胞周期調(diào)控相關(guān)蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

Guanylate Cyclase產(chǎn)品名稱: 鳥苷suan環(huán)化mei/GCS-β-2/GCS-β2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse

GLUT12產(chǎn)品名稱: 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白12抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig

Phospho-MEK6 (Ser202)產(chǎn)品名稱: 絲裂原活化蛋白激meiMKK6抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

phospho-CREB-1 (Ser133)產(chǎn)品名稱: CREB-1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep

FAAH2產(chǎn)品名稱: 脂肪suan酰胺水解mei2抗體交叉反應(yīng): Human, Bee   

磷脂爬行酶4(PLSCR4)重組蛋白人白介su1受體關(guān)聯(lián)激mei3(IRAK3)ELISA試劑盒IRAK3白介su1受體關(guān)聯(lián)激mei3elisa檢測試劑盒Human Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 3(IRAK3)ELISA Kit

人白介su1受體關(guān)聯(lián)激mei1(IRAK1)ELISA試劑盒IRAK1白介su1受體關(guān)聯(lián)激mei1elisa kitHuman Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 1(IRAK1)ELISA Kit

人白介su1受體輔助蛋白樣蛋白2(IL1RAPL2)ELISA試劑盒IL1RAPL2白介su1受體輔助蛋白樣蛋白2ELISA試劑盒Human Interleukin 1 Receptor Accessory Protein Like Protein 2(IL1RAPL2)ELISA Kit

人白介su1θ(IL1θ)ELISA試劑盒IL1θ白介su1θelisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Interleukin 1 Theta(IL1F10)ELISA Kit

人白介su1η(IL1η)ELISA試劑盒IL1η白介su1ηelisa檢測試劑盒Human Interleukin 1 Eta(IL1h)ELISA Kit