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當前位置:首頁產品中心定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒50T雞敗血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

雞敗血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
產品簡介

雞敗血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

更新時間:2020-09-29
廠商性質:經銷商
訪問量:351
產品型號:50T
詳細介紹在線留言

實驗過程:
一、雞敗血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.產品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
參數規格:
產品名稱:雞敗血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycoplasma galliscepticum
產品規格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據機型決定,具體見使用方法)。
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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產品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
以下是公司正在熱銷的產品:
99%100g1gcis宮部苔草酚C111660Creatine Kinase BB Isoenzymes

蘆筍  英文名稱:Asparagus   保存:-20℃   規格:5g 化絲氨/蘇氨激酶p90RSK蛋白抗體

胰島素(INS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)重組人 GOPC / PIST 蛋白 (His 標簽)*250(g)

人腫瘤壞死子β (TNFβ)KIAA1576/VAT1L  囊泡胺轉運蛋白1家族蛋白抗體規格:96T/48TAmifostine規格:350mgCD4分子檢測試盒20mg人肝癌細胞,SMMC7721細胞1x10^6cells

95%5g250mg奈酚3O(2',6'二O反式對香豆酰基)betaD葡萄糖苷629732Creatine Kinase

原堿;Protopine 規格: 20mg 訂購|咨詢 大鼠子宮內膜上細胞*培養基100mL

胰島素(INS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)重組人 ADA / Adenosine deaminase 蛋白 (His 標簽)*250(g)

人腫瘤壞死子β (TNFβ)BOLA1  BOLA1蛋白抗體規格:96T/48TAmifostine Disulfide規格:2gCD8分子檢測試盒20mg人肝癌細胞,SNU387細胞1x10^6cells

98%100g250mg性酶(ACP)檢測試劑盒(麝香草酚肽微板法)Cyclindependent kinase 1

阿糖胞苷 質量規格:>99.0%,細胞培養級 Cytarabine Hoagland Nitrogen-free MediumBR20升國產/進口

Rabbit Antihuman kchain Whole serum  兔抗人k鏈抗血清*血紅素檢測試盒500gHuman/人Elisa試盒4837905

99%5g1g性酶(ACP)檢測試劑盒(PNP比色法)IL1 Receptor Like 1

N-去甲基羅格列 質量規格:國進口 N-Desmethyl Rosiglitazone K562/慢性髓性白血病細胞株國產

Rabbit Antihuman Gammachain Whole serum  兔抗人γ鏈抗血清進口、分裝凝血酶原片段F1+2檢測試盒100gHuman/人Elisa試盒4848435

99%25g100mg性酶(ACP)檢測試劑盒(PNP比色法)truncatedcadherin

乙酰;純品型;標準品;有證書 規格: 0.1g 訂購|咨詢 人前脂肪細胞*培養基100mL

Rabbit AntiMK IgG Whole serum  兔抗猴IgG抗血清進口、原裝酪氨羥基轉移酶檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒4856977
雞敗血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒氨; DAlanine CAS號: 338692 規格: 100mg 訂購|咨詢

檳榔堿;Arecoline hydrob CAS號: 300083 規格: 50mg 訂購|咨詢

巴西蘇木素;Brazilin CAS號: 474077 規格: 20mg 訂購|咨詢

別隱品堿;Allocryptopine CAS號: 485916 規格: 20mg 訂購|咨詢

3表中國臺灣三尖杉堿;3Epiwilso CAS號: 39024152 規格: 20mg 訂購|咨詢

半枝蓮堿;Scutebarbatine CAS號: 176520131 規格: 20mg 訂購|咨詢

白芷屬腦;Heraclenol CAS號: 31575936 規格: 20mg 訂購|咨詢

Α波菜甾;ASpinasterol CAS號: 481185 規格: 20mg 訂購|咨詢

21表千層塔二;21Episer CAS號: 1449065 規格: 20mg 訂購|咨詢

貝萼皂苷元;Bayogenin CAS號: 6989248 規格: 20mg 訂購|咨詢

白花前胡素 ;Praeruptorin CAS號:  規格: 20mg 訂購|咨詢

扁柏雙黃 ;hinokiflavone CAS號: 19202369 規格: 20mg 訂購|咨詢

補骨脂素;Coryfolin CAS號: 19879324 規格: 20mg 訂購|咨詢

扁蓄苷;avicularin CAS號: 572305 規格: 20mg 訂購|咨詢

表木栓;Friedelan3beta CAS號: 16844716 規格: 10mg 訂購|咨詢
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。

 

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