產品名稱：順烏頭酸酶（ACO）活性檢測試劑盒品牌

規格 : 50管/48樣、100管/96樣

測試方法:微量法、紫外分光光度法

貨號：YS-01S6457

測定意義

順烏頭酸酶（aconitase），三羧酸循環中的酶，催化檸檬酸轉變為異檸檬酸。檸檬酸本身不易氧化，在順烏頭酸酶作用下，通過脫水與加水反應，使羥基由β碳原子轉移到α碳原子上，生成易于脫氫氧化的異檸檬酸，為進一步的氧化脫羧反應作準備。

測定原理

ACO催化檸檬酸轉化成異檸檬酸，異檸檬酸氧化脫羧將NAD+ 還原生成NADH，導致340nm處光吸收上升。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

【友情提示】：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。

5 ）. 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

特點:

(1)應用廣泛

由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應學科的發展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當的顯色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。

(4)準確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經預富集后)。

(6)分析成本低、操作簡便、快速

Anti-HSP-70/HRP 辣根過氧化物酶標記熱休克蛋白70抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

human IgM (親和純化)人IgMMulti-class antibodies規格： 1mg

抗組蛋白抗體 Anti-Histone H3 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG 兔抗馬IgG 1mg

FAM78B 英文名稱： FAM78B蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-RKIP (Ser 153) 磷酸化Raf激酶抑制蛋白抗體 規格 0.1ml

human IgM (親和純化)人IgMMulti-class antibodies規格： 1mg

TP53(tumor protein p53; Li-Fraumeni syndrome) 抗P53抗原Multi-class antibodies規格： 0.5ml

Anti-Caldesmon 鈣介質素抗體Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PDHB 丙酮酸脫氫酶E1β亞單位抗體 規格 0.2ml

Bcl-2 濃縮液 0.1ml 進口分裝

TrkA 英文名稱： 酪酸激酶A抗體 0.1ml

Phospho-CEBP alpha (Thr222 + Thr226) 英文名稱： 磷酸化轉錄調節因子CEBP α 抗體 0.1ml

Anti-Caldesmon 鈣介質素抗體Multi-class antibodies規格： 0.2ml

SOCS1 英文名稱： 細胞因子信號傳導抑制蛋白1抗體 0.1ml

Epac1 英文名稱： 環磷酸腺苷調節鳥嘌呤核苷酸交換因子1抗體 0.2ml

孤菲肽/痛敏肽抗體 Anti-Nociceptin 0.1ml

Anti-Phospho-RIP2 (Ser176) /FITC 熒光素標記磷酸化受體結合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-p53BP1(Ser25/29) 磷酸化p53結合蛋白1抗體 規格 0.1ml

ABCG1 peptide 三磷酸腺苷結合盒亞家族G1抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg
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