產(chǎn)品名稱：高密度脂蛋白（HDL-C）測(cè)試盒品牌

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測(cè)試方法:微量法、可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6489

測(cè)定意義

高密度脂蛋白為血清蛋白之一，主要由肝臟合成，運(yùn)載周圍組織中的膽固醇，再轉(zhuǎn)化為膽汁酸或直接通過(guò)膽汁從腸道排出，是一種抗動(dòng)脈粥樣硬化的血漿脂蛋白，是冠心病的保護(hù)因子，俗稱“血管清道夫"，對(duì)冠心病的臨床診斷是一個(gè)重要的參考指標(biāo)。

測(cè)定原理

用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白膽固醇，利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸，從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC；進(jìn)一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-膽甾烯酮和H2O2；再利用過(guò)氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比和酚，生成紅色醌類化合物；在500nm有特征吸收峰。

需自備的儀器和用品

離心機(jī)，恒溫水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明！

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過(guò)濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

Fibulin 1 衰老關(guān)鍵蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

癌易感基因1抗體(人) Anti-BRCA1 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Doublecortin (Ser297) 磷酸化雙皮質(zhì)素抗體 規(guī)格 0.1ml

PVDF膜(30cm×3m 0.45um) 1卷 Millipore

ZNHIT1 英文名稱： 細(xì)胞周期蛋白1結(jié)合蛋白抗體 0.2ml

DCP1A 英文名稱： 脫帽酶1A抗體 0.2ml

癌易感基因1抗體(人) Anti-BRCA1 0.1ml

EV71(Human enterovirus 71)VP1(CT) 腸道病毒71型/手足口病病毒抗原(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體 Anti-BBC3/PUMA 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Ser1190) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml

DMEM高糖(含酸鈉) 10×1L Gibco

ZNF843 英文名稱： 鋅指蛋白843抗體 0.2ml

Dystrobrevin alpha 英文名稱： 肌營(yíng)養(yǎng)蛋白α抗體 0.2ml

p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體 Anti-BBC3/PUMA 0.1ml

ZDHHC17 英文名稱： NFκB激活蛋白205抗體 0.1ml

DIS3L2 英文名稱： 有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體 0.2ml

磷酸化雄受體抗體 Anti-phospho-AR 0.1ml

Anti-CEA/Biotin 生物素化鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(檢測(cè))IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-EIF4G1(Ser1238) 磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體 規(guī)格 0.1ml

EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸運(yùn)載蛋白3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
高密度脂蛋白（HDL-C）測(cè)試盒品牌氘代(100g )甘草查爾酮通用化學(xué)封閉溶液

氘代苯-D6(0.6ml x 10 )大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷化學(xué)封閉溶液

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