產(chǎn)品名稱(chēng)：ATP含量測(cè)試盒品牌

規(guī)格 : 50管/24樣、100管/48樣

測(cè)試方法:微量法、可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6437

測(cè)定意義

ATP廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是生物能量通貨，能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測(cè)定ATP含量并且計(jì)算能荷，能夠反映能量代謝狀態(tài)。

測(cè)定原理：

肌酸激酶催化肌酸和ATP反應(yīng)生成磷酸肌酸，可在700nm下用磷鉬酸比色法檢測(cè)磷酸肌酸含量，以此反應(yīng)ATP含量。

自備儀器和用品：

分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明！

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過(guò)濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿(mǎn)意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

Anti-TGF- BetaR 2/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

NKB (Neurokinins B) 神經(jīng)激肽B(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

抗相關(guān)抗原5抗體 Anti-SPAG5/map126 0.1ml

SERPINB12 英文名稱(chēng)： 絲酸蛋白酶抑制劑B12抗體 0.2ml

EHM2 英文名稱(chēng)： EHM2蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAP4K4(Ser801) 磷酸化原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 規(guī)格 0.1ml

NKB (Neurokinins B) 神經(jīng)激肽B(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

PAK7/PAK5/MBT 激活激酶PAK7/PAK5抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-ATF2 活化復(fù)制因子2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-APP/ABPP (Ser730) 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Somatostatin 生長(zhǎng)抑素 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

UBE2D4 英文名稱(chēng)： 泛素蛋白連接酶D4抗體 0.2ml

DDRGK1 英文名稱(chēng)： DDRGK1蛋白抗體 0.2ml

Anti-ATF2 活化復(fù)制因子2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

SCYLV 英文名稱(chēng)： 甘蔗SCYLV抗體 0.2ml

EML4 英文名稱(chēng)： 限制過(guò)度增殖相關(guān)蛋白EML4抗體 0.2ml

Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體 Anti-ROCK2 0.1ml

Anti-Phospho-TAK1 (Ser412)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MK1+MK2(Ser222/Ser226) 磷酸化原活化蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

APG4B/AUTL1 APG4B細(xì)胞自噬相關(guān)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
ATP含量測(cè)試盒品牌2-(>99%,BR)鼠李糖組織可溶性總蛋白制備試劑盒

5-硝基-2-氯苯甲(>98%,BR)甜菜堿同位素/酵母蛋白核酸結(jié)合凝膠遷移電泳分析試劑盒

2-氯乙酰(>98.5%,BR)鹽酸甜菜堿生物素/酵母蛋白核酸結(jié)合凝膠遷移電泳分析試劑盒

2-氯苯(>98%,BR)甜菊苷同位素核酸（PCR產(chǎn)物）蛋白結(jié)合DNA酶足跡法分析試劑盒

2-氯乙基磺酸鈉(>98%,BR)天麻素同位素核酸（酶切產(chǎn)物）蛋白結(jié)合DNA酶足跡法分析試劑盒

2'-脫氧肌酐-5'-磷酸鈉(>98%,BR)熊果酸同位素核酸（PCR產(chǎn)物）蛋白結(jié)合甲基化干擾足跡法分析試劑盒

鄰乙氧基苯甲(>98%,BR)熊果苷同位素核酸（酶切產(chǎn)物）蛋白結(jié)合甲基化干擾足跡法分析試劑盒

鄰乙氧基(>98%,BR)辛弗林[γ32P]ATP酶標(biāo)記法PCR產(chǎn)物處理試劑盒