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產(chǎn)品名稱：游離膽固醇（FC）含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測(cè)試方法:微量法、可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6483

測(cè)定意義

膽固醇廣泛存在于動(dòng)物體內(nèi)，尤以腦及神經(jīng)組織中最為豐富，在腎、脾、皮膚、肝和膽汁中含量也高。膽固醇是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素等生理活性物質(zhì)的重要原料，也是構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分，其血清濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。動(dòng)脈粥樣硬化、靜脈血栓形成與膽石癥與高膽固醇血癥有密切的相關(guān)性。

測(cè)定原理

游離膽固醇在膽固醇氧化酶作用下生成△4-膽甾烯酮和H2O2，H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下，經(jīng)過(guò)氧化物酶作用下生成紅色醌類化合物，其顏色深淺與FC含量成正比。

自備用品

可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水。

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過(guò)濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

F1 operon positive regulatory protein(CT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(C端多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

丁酰膽堿脂酶抗體(C端) Anti-BCHECT 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-EGFR (Ser1045) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml

新生血清 200ml 四季青

ZNF266 英文名稱： 鋅指蛋白266抗體 0.2ml

DCL-1 英文名稱： C型凝集素受體CLEC13A抗體 0.1ml

丁酰膽堿脂酶抗體(C端) Anti-BCHECT 0.1ml

UTS2R/GPR14(Urotensin II receptor：G Protein Coupled Receptor 14) G蛋白偶聯(lián)受體14抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

PLAUR PLAUR / CD87 / uPAR 鼠單抗 (PE) Human

Rhesus antibody Rh phospho-CSF1R(Tyr923) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml

考馬斯亮藍(lán)R-250蛋白快速染色液 250ml 自產(chǎn)

ZNF347 英文名稱： 鋅指蛋白347抗體 0.2ml

DAT1 英文名稱： 神經(jīng)細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子DAT1抗體 0.2ml

PLAUR PLAUR / CD87 / uPAR 鼠單抗 (PE) Human

ZADH1 英文名稱： 鋅結(jié)合乙醇脫氫酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml

DYRK1A 英文名稱： 絲酸/蘇酸蛋白激酶MNB抗體 0.2ml

銜接蛋白β抗體 Anti-beta Adaptin/AP2 0.1ml

Anti-Gentamicin Monoclonal Antibody /Gold 膠體金離子標(biāo)記小鼠抗慶大霉素單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.5ml(35nm-40nm)

Rhesus antibody Rh phospho-ER-beta(ser87) 磷酸化雌受體β抗體 規(guī)格 0.1ml

Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat) 防御素β2抗原(大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
游離膽固醇（FC）含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)氘代乙(25 mL )10-姜酚全組織組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB*間接檢測(cè)試劑盒（含一抗和HRP二抗）

氘代乙(25g )石斛堿全組織組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB直接檢測(cè)試劑盒（含HRP一抗）

氘代乙(50g )雷公藤內(nèi)酯酮全組織組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測(cè)試劑盒（無(wú)一抗和二抗）

氘代甲苯(5 g )異阿魏酸全組織組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測(cè)試劑盒（含AP二抗）

氘代甲苯(10 g )豆甾全組織組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP*間接檢測(cè)試劑盒（含一抗和AP二抗）

氘代甲苯(25 g )芒柄花苷全組織組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP直接檢測(cè)試劑盒（含AP一抗）

氘代酮(0.50mlx10)沒(méi)食子兒茶素全組織熒光顯微鏡基礎(chǔ)檢測(cè)試劑盒（無(wú)一抗和二抗）

氘代酮(0.50mlx10)牡荊素葡萄糖苷全組織熒光顯微鏡間接檢測(cè)試劑盒（含熒光二抗）
操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。