商品屬性：

產品信息：

產品名稱 大鼠脈絡膜黑色素細胞

組織來源 脈絡膜組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 大鼠脈絡膜黑色素細胞分離自眼球脈絡膜組織；脈絡膜在視網膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細胞，對外力沖擊的耐受性較視網膜差，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色，圍繞視神經乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細血管組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網膜之間，續連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環營養視網膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養視網膜外層及玻璃體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用，對整個視覺神經有調節作用。續連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細胞，有營養和遮光作用。

方法簡介 實驗室分離的大鼠脈絡膜黑色素細胞先用消化、后-膠原酶混合消化結合專用培養基篩選法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的大鼠脈絡膜黑色素細胞經Dopa染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

自備試劑：0.25%、PBS、培養基

培養基：大鼠脈絡膜黑色素細胞培養基(基礎培養基，含FBS、bFGF、Insulin、Transferrin、NEAA、L-抗壞血酸、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：長梭形

傳代比例：1:2

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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