細胞簡介：

產品名稱 大鼠腎上腺皮質細胞

組織來源 腎上腺組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 大鼠腎上腺皮質細胞分離自腎上腺組織；腎上腺是機體相當重要的內分泌器官，由于位于兩側腎臟的上方，故名腎上腺。腎上腺左右各一，位于腎的上方，共同為腎筋膜和脂肪組織所包裹。左腎上腺呈半月形，右腎上腺為三角形。從側面觀察，腺體分腎上腺皮質和腎上腺髓質兩部分，周圍部分是皮質，內部是髓質。腎上腺內部是髓質部分，分泌腎上腺素。這些激素在應激狀態釋放增多，能夠幫助升高血壓，加快心率，升高血糖，動員全身的儲備物質，為機體與外界環境的抗爭作好充分準備。腎上腺外部是皮質部分，分泌醛固酮、和少量的雌雄激素。醛固酮能夠促進小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收，正常數量的醛固酮，對維持機體正常血壓有重要作用。但是如果過多分泌，會導致高血壓和低血鉀。是機體必需的激素之一。當機體處于應激狀態時，比如感冒，發燒，遇到突發事件的時候，腎上腺皮質分泌大量的，這些能夠動員機體的存儲能源，為應對內部或者外部重要事件提供充分的物質準備。當缺乏時，機體在遇到重大事件的時候，往往缺乏足夠應對能力，容易被病毒或外界壓力所擊倒。腎上腺產生的雄激素，對雄性來講，并非，但是對雌性而言，是雄激素的一個重要來源。

方法簡介 實驗室分離的大鼠腎上腺皮質細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的大鼠腎上腺皮質細胞經3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品信息：

培養信息：

自備試劑：0.25%、鼠尾膠原蛋白Ⅰ型（1×）或鼠尾膠原蛋白Ⅰ型（1mg/mL）、PBS、培養基

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基：大鼠腎上腺皮質細胞 培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：梭形、多角形

傳代比例：1:2

傳代特性：可傳1-3代左右；2代以內狀態佳

消化液：0.25%

凍存步驟：

凍存前準備?

確保細胞處于對數生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎培養基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉入液氮?。

公司正在出售的產品：

操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標志物表達，確認細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術檢測細胞電特性（如鈉電流）。