細胞簡介：

產品名稱 大鼠尾動脈內皮細胞

組織來源 尾動脈組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 大鼠尾動脈內皮細胞分離自尾動脈組織；尾動脈是鼠尾的主要血管，尾部主要大血管分布表淺，尾側靜脈適于注射給藥，尾正中動脈適于動脈采血、練習顯微外科血管吻合技術等，實際應用相當普遍。許多動物模型也使用鼠尾。鼠尾部血管豐富，供血來源于薦中動脈和臀上動脈兩個動脈，形成尾椎節段性分布和縱向貫通分布相結合的特點，尾部淺層3套縱向動靜脈系統，鼠尾背側為不規則動靜脈鏈狀結構，深層血管與淺層血管雙層籠狀以每節脊椎為單位溝通，且呈動靜脈血管徑不匹配的特點。通過研究發現鼠尾存在兩套血源: 薦中動脈和臀上動脈。其在尾部依尾橫動脈形成溝通。尾橫動脈呈尾椎節段性分布，直接溝通尾正中動脈、尾深動脈和皮支。在尾部被橫斷后，可以保持損傷節段以上尾椎的動靜脈回流通路; 鼠尾存在動靜脈口徑明顯不規范的現象: 尾外側靜脈明顯大于伴隨的動脈，而正中動脈明顯大于伴隨的靜脈，形成供血主要來自腹面的尾正中動，回血主要依靠兩側的尾側靜脈，符合腹面動脈保護的安全性，同時利于血管散熱，尾橫動脈提供了不同血源體系的溝通渠道。參考文獻[王蕾，葉明霞.大鼠尾部血管的解剖結構與鼠尾的生理功能探討]。

方法簡介 實驗室分離的大鼠尾動脈內皮細胞采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的大鼠尾動脈內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品信息：

培養信息：

自備試劑： 0.25%  、多聚-L-賴溶液（1×）或多聚-L-賴溶液（10×）或明膠包被液（1 mg/mL）  、PBS  、培養基

包被條件： PLL（0.1 mg/mL）或明膠（0.1%）

培養基： 大鼠尾動脈內皮細胞 培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 內皮細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳1-2代

消化液：0.25%

凍存步驟：

凍存前準備?

確保細胞處于對數生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎培養基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉入液氮?。

公司正在出售的產品：

操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標志物表達，確認細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術檢測細胞電特性（如鈉電流）。