商品屬性：

產品信息：

產品名稱 大鼠外周血白細胞

簡稱 PBL;PWBC

組織來源 外周血

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 大鼠外周血白細胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細胞（Leukocyte），舊稱白血球，血液中的一類細胞。根據白細胞的細胞質內有無特殊顆粒，可將其分為有粒白細胞和無粒白細胞。前者常簡稱為粒細胞，根據其特殊顆粒的染色特性，又分為中性粒細胞、嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞，白細胞也通常被稱為免疫細胞。在顯微鏡下可以看到，血細胞中體積比較大、數量比較少，具有細胞核；其主要作用是吞噬細菌、防御疾病。

方法簡介 實驗室分離的大鼠外周血白細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的大鼠外周血白細胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

自備試劑： 0.25%  、PBS  、培養基

培養基： 大鼠外周血白細胞 培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 懸浮

細胞形態： 圓形

傳代比例： 不傳代

傳代特性： 不增殖；不傳代

消化液：0.25%

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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