商品屬性：

產品信息：

產品名稱 大鼠牙乳頭細胞

簡稱 DPCs

組織來源 牙乳頭組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 大鼠牙乳頭細胞分離自牙乳頭組織；牙乳頭細胞來源于外胚間充質，具有多向分化潛能，是體內分化為成牙本質細胞的前體細胞，該細胞在牙發育和牙體牙髓損傷修復過程中起重要作用。牙乳頭細胞為未分化的間充質細胞，有少量微細的膠原纖維分散在細胞外間隙。在鐘狀期，被成釉器凹陷部包圍的外胚間葉組織增多，并出現細胞的分化。在內釉上皮的誘導下，牙乳頭外層細胞分化為高柱狀的成牙本質細胞。這些細胞在切緣或牙尖部為柱狀，在牙頸部細胞尚未分化成熟，為立方狀。牙乳頭在牙發育中有重要作用。現已證明，牙乳頭是決定牙形狀的重要因索。例如，將切牙的成釉器與磨牙的牙乳頭重新組合，結果形成磨牙；與此相反，切牙的牙乳頭與磨牙成釉器重新組合，結果形成切牙。牙乳頭還可以誘導非牙源性的口腔上皮形成成釉器。

方法簡介 實驗室分離的大鼠牙乳頭細胞采用混合膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的大鼠牙乳頭細胞經膠原蛋白Ⅰ，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

自備試劑： 0.25%  、PBS  、培養基

培養基： 大鼠牙乳頭細胞培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 梭形、多角形

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳1-2代

消化液：0.25%

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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