商品屬性：

產品信息：

產品名稱 兔骨外膜細胞

組織來源 骨組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 兔骨外膜細胞分離自骨外膜組織；骨外膜是指成骨細胞與破骨細胞緊貼骨密質外面包著的那層膜；在骨外膜和骨內膜中含有種能夠生成骨的細胞，稱為成骨細胞，這種細胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外種專門破壞骨細胞的細胞，稱為破骨細胞。這兩種細胞作用相反又相互依據。成骨細胞像建筑工人，不停地生成新的骨組織，破骨細胞則像修工人，不停地清除老化、死亡、破碎的骨結構，并且還負責拆除“違章建筑"，就是除去不需要的多余的骨組織，從而使骨的整體結構更符合生物力學的需要。正常情況下，兩種細胞之間處于動態的平衡之中，完成骨的生長發育的新陳代謝。骨折之后，成骨細胞首先啟動，從而促使新骨痂的生成，即骨折的愈合。但是，股痂只是恢復了骨的連續性，往往不符合生物力學的需要，改建塑形的過程則必須有破骨細胞的參與才能完成。

方法簡介 實驗室分離的兔骨外膜細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的兔骨外膜細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養基

培養基： 兔骨外膜細胞培養基(基礎培養基，含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 成纖細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液： 0.25%

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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