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原代細(xì)胞
兔原代細(xì)胞
YS-01X8415兔氣管軟骨細(xì)胞圖片





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ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 兔氣管軟骨細(xì)胞圖片 | 英文名稱 | Rabbit Tracheal Chondrocytes |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X8415 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 兔氣管軟骨細(xì)胞
組織來源 氣管組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡介 兔氣管軟骨細(xì)胞分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。軟骨由軟骨細(xì)胞和細(xì)胞間質(zhì)組成。軟骨內(nèi)的基質(zhì)呈凝膠狀態(tài),具有較大韌性。軟骨是以支持作用為主的結(jié)締組織。軟骨內(nèi)不含血管和淋巴管,營養(yǎng)物由軟骨膜內(nèi)的血管中滲透到細(xì)胞間質(zhì)中,再營養(yǎng)骨細(xì)胞。根據(jù)細(xì)胞間質(zhì)的不同可把軟骨分為3種,即透明軟骨、彈性軟骨和纖軟骨。透明軟骨的基質(zhì)是由膠原纖、原纖和周圍無定形的基質(zhì)組成。在胚胎時期有臨時支架作用,后來這種作用被骨代替。成人的透明軟骨主要分布在氣管和支氣管壁中、肋骨的胸骨端和骨的表面(關(guān)節(jié)軟骨)。
方法簡介 實驗室分離的兔氣管軟骨細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔氣管軟骨細(xì)胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基
培養(yǎng)基: 兔氣管軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含F(xiàn)BS、EGF、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每3-4天換液次
生長特性: 貼壁
細(xì)胞形態(tài): 梭形、多角形
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液: 0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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