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兔原代細胞
YS-01X8423兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞品牌





產(chǎn)品簡介
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產(chǎn)品名稱 | 兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞品牌 | 英文名稱 | Rabbit Microglia |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X8423 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞
組織來源 腦組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細胞簡介 兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每個半球都有三個面,即外側(cè)面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質(zhì)細胞是神經(jīng)膠質(zhì)細胞的種,相當(dāng)于腦和脊髓中的巨噬細胞,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的道也是主要的道免疫防線。小膠質(zhì)細胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質(zhì)細胞的20%,小膠質(zhì)細胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng),斑塊及感染性物質(zhì)。無數(shù)臨床上和理學(xué)研究表明激活的小膠質(zhì)細胞在神經(jīng)退化類疾病的發(fā)病機理中起到十分重要的作用,如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質(zhì)細胞會引起神經(jīng)毒性。它們是促炎因子和氧化應(yīng)激的重要來源,如腫瘤壞死因子(TNF),氧化氮,白介素等有神經(jīng)毒性的物質(zhì)。神經(jīng)小膠質(zhì)細胞的主要功能:①神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中;②當(dāng)程序性細胞死亡時,或在大腦發(fā)育的過程中,中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時,神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細胞;③膠質(zhì)細胞能在Ⅱ類組織相容性復(fù)合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原,能進行Fc介導(dǎo)的巨噬作用,并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。
方法簡介 實驗室分離的兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法,在培養(yǎng)基營養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細胞制備而來,細胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞經(jīng)CD11b免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: (12 mM) 、PBS 、培養(yǎng)基
培養(yǎng)基: 兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含F(xiàn)BS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液次
生長特性: 貼壁
細胞形態(tài): 梭形、多角形
傳代比例: 不傳代
傳代特性: 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液: (12 mM)
兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
原代細胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細胞死亡。
?細胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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