細胞簡介：

產品名稱 兔胸腺上皮細胞

組織來源 胸腺組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 兔胸腺上皮細胞分離自胸腺組織；胸腺是機體重要的淋巴器官，其功能與免疫緊密相關，是T細胞分化、發育、成熟的場所，還可以分泌胸腺及類物質，具有內分泌技能的器官。胸腺上皮細胞和胸腺細胞是胸腺微環境的重要組成部分，其外，胸腺上皮細胞組成了胸腺細胞不同發育階段的三結構，根據其在胸腺中位置不同，可分為皮質胸腺上皮細胞和髓質胸腺上皮細胞。胸腺細胞的發育和成熟是通過在胸腺皮質和髓質上皮細胞的遷移過程中相互作用完成的。此外，胸腺細胞通過皮質胸腺上皮細胞介導的陽性選擇和髓質胸腺上皮細胞介導的陰性選擇發育為能夠識別和耐受自身主要組織相容復合體和自身抗原的成熟T淋巴細胞。胸腺上皮細胞是構成胸腺微環境的主要成份，其形態、分布和功能多樣。表面抗原表達具有高度異質性，與胸腺細胞結合成不同類型復合體，部分胸腺上皮細胞相互排列構成囊泡樣結構。電鏡觀察，可把胸腺上皮細胞分為3-6型，用抗胸腺上皮細胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細胞分為9種類型。

方法簡介 實驗室分離的兔胸腺上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的兔胸腺上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品信息：

培養信息：

自備試劑： 0.25% 、鼠尾膠原蛋白Ⅰ型（1×）或鼠尾膠原蛋白Ⅰ型（1 mg/mL） 、PBS 、培養基

包被條件： 鼠尾膠原Ⅰ（2-5 μg/cm2）

培養基： 兔胸腺上皮細胞 培養基(基礎培養基，含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 上皮細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳1?綜?

凍存步驟：

凍存前準備?

確保細胞處于對數生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎培養基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉入液氮?。

公司正在出售的產品：

操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標志物表達，確認細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術檢測細胞電特性（如鈉電流）。