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小鼠原代細胞
YS-01X8493小鼠鼻黏膜上皮細胞培養(yǎng)





產(chǎn)品簡介
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產(chǎn)品名稱 | 小鼠鼻黏膜上皮細胞培養(yǎng) | 英文名稱 | Mouse Nasal Mucosal Epithelial Cells |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X8493 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 小鼠鼻黏膜上皮細胞
組織來源 鼻黏膜組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細胞簡介 小鼠鼻黏膜上皮細胞分離自鼻黏膜組織;黏膜是覆蓋在機體內(nèi)消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內(nèi)壁的層組織結(jié)構(gòu),由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同,有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結(jié)構(gòu)也因功能、部位不而不盡相同。鼻腔黏膜,簡稱鼻黏膜,覆蓋于鼻腔表面,黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。根據(jù)結(jié)構(gòu)與功能的不同,鼻黏膜又分為前庭部、呼吸部和嗅部三部分。前庭部是鄰近外鼻孔的部分,有豐富的鼻毛可以阻擋空氣中較大的塵粒吸入。呼吸部占鼻黏膜的大部,有發(fā)達的上皮纖毛,它們可向咽部擺動,黏著有塵粒、細菌的黏液排向咽部,終將它們排出體外。此外,此部分有豐富的血管與腺體,對吸入的空氣有加溫和濕潤作用。嗅部黏膜范圍較小,主要位于鼻腔頂部。它含有種專司嗅覺的嗅細胞及嗅腺,它們分泌能溶解到達嗅區(qū)的含氣味的微粒,刺激嗅細胞表面上的嗅毛產(chǎn)生嗅覺,而且還由于嗅細胞具有不同的受體,可分別接受不同化學(xué)分子的刺激,因此可產(chǎn)生不同的嗅覺。
方法簡介 實驗室分離的小鼠鼻黏膜上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實驗室分離的小鼠鼻黏膜上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、鼠尾膠原蛋白Ⅰ型(1×)或鼠尾膠原蛋白Ⅰ型(1 mg/mL) 、PBS 、培養(yǎng)基
包被條件: 鼠尾膠原Ⅰ(2-5 μg/cm2)
培養(yǎng)基: 小鼠鼻黏膜上皮細胞 培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含F(xiàn)BS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液次
生長特性: 貼壁
細胞形態(tài): 上皮細胞樣
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可
原代細胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細胞死亡。
?細胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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