細胞簡介：

產(chǎn)品名稱 小鼠頜下腺上皮細胞

組織來源 頜下腺組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 小鼠頜下腺上皮細胞分離自頜下腺組織；頜下腺是下頜部的唾液腺，左右各個。頜下腺屬于唾液腺的種，主要的功能就是分泌唾液。機體共有三大唾液腺，包括腮腺、頜下腺及舌下腺。頜下腺位于下頜骨的下方，接近下頜骨彎曲角附近，所以也叫下頜下腺（下頜骨下方的唾液腺），左右各，由舌下舌系帶兩側(cè)處伸出頜下腺排泄管，主要分泌黏液和漿液狀性質(zhì)的唾液。頜下腺上皮細胞是種高度分化的上皮細胞，在體外難以長期存活和保持分化狀態(tài)；頜下腺的主要病理變化有：①頜下腺炎；②頜下腺囊腫；③頜下腺腫；④頜下腺結(jié)石。

方法簡介 實驗室分離的小鼠頜下腺上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實驗室分離的小鼠頜下腺上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品信息：

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、鼠尾膠原蛋白Ⅰ型（1×）或鼠尾膠原蛋白Ⅰ型（1 mg/mL） 、PBS 、培養(yǎng)基

包被條件： 鼠尾膠原Ⅰ（2-5 μg/cm2）

培養(yǎng)基： 小鼠頜下腺上皮細胞 培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態(tài)： 上皮細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳1-2代

消化液： 0.25%

凍存步驟：

凍存前準(zhǔn)備?

確保細胞處于對數(shù)生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養(yǎng)上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養(yǎng)基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數(shù)100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮?。

公司正在出售的產(chǎn)品：

操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續(xù)梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養(yǎng)?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養(yǎng)基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養(yǎng)?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質(zhì)細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標(biāo)記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標(biāo)志物表達，確認(rèn)細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術(shù)檢測細胞電特性（如鈉電流）。