細胞簡介：

產品名稱 小鼠髖臼軟骨細胞

組織來源 軟骨組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 小鼠髖臼軟骨細胞分離自髖關節軟骨組織，髖關節是人體、穩定的關節之，是典型的球臼關節。髖關節既具有良好的內在穩定性，也具有靈活的活動性。髖臼位于髖骨外側面，呈半球形深凹，直徑約30-50 mm，表面覆蓋厚約2 mm的透明關節軟骨，呈半月形分布。是髖臼窩，無軟骨覆蓋，由哈佛腺充填，可以隨關節內壓力的增減擠出或者吸入關節液，以持關節內壓力的平衡。髖臼邊緣的環形關節盂唇可以加深、加寬髖臼，使髖臼容納股骨頭的大部并處于穩定的位置，加強了髖關節的穩定性。幼稚的關節軟骨細胞位于關節軟骨組織的表層，單個分布、體積較小、呈橢圓形，長軸與關節軟骨表面平行，越向深層的關節軟骨細胞體積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形、染色淺，細胞質弱嗜堿性，常見數量不的脂滴。成熟的關節軟骨細胞多2-8個成群分布于關節軟骨陷窩內，這些關節軟骨細胞由同個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，關節軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，關節軟骨細胞收縮為不規則形，在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的關節軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介 實驗室分離的小鼠髖臼軟骨細胞采用膠原酶聯合消化制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的小鼠髖臼軟骨細胞經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品信息：

培養信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養基

培養基： 小鼠髖臼軟骨細胞培養基(基礎培養基，含FBS、EGF、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每3-4天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 梭形、多角形

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳2-3代左右

消化液： 0.25%

凍存步驟：

凍存前準備?

確保細胞處于對數生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎培養基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉入液氮?。

公司正在出售的產品：

操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標志物表達，確認細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術檢測細胞電特性（如鈉電流）。