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原代細(xì)胞
小鼠原代細(xì)胞
YS-01X7702小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞規(guī)格





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ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞規(guī)格 | 英文名稱 | Mouse Trigeminal Nerve Astrocytes |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X7702 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞
組織來源 腦組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡介 小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自三叉神經(jīng)組織;三叉神經(jīng)為粗大的混合性腦神經(jīng),含般軀體感覺和特殊內(nèi)臟運動兩種纖。其特殊內(nèi)臟運動纖起于腦橋中段的三叉神經(jīng)運動核,纖組成三叉神經(jīng)運動根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,位于感覺根下內(nèi)側(cè),后進入三叉神經(jīng)第3支下頜神經(jīng)中,經(jīng)卵圓孔出顱,隨下頜神經(jīng)分支分布于咀嚼肌等。運動根內(nèi)還含有三叉神經(jīng)中腦核有關(guān)的纖,主要傳導(dǎo)咀嚼肌的本體感覺。三叉神經(jīng)內(nèi)以軀體感覺神經(jīng)纖為主,這些纖的細(xì)胞體位于三叉神經(jīng)節(jié)(半月節(jié))內(nèi),該神經(jīng)節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉神經(jīng)壓跡處,為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)組織中除神經(jīng)元以外的另大類細(xì)胞,也有突起,但無樹突和軸突之分,廣泛分布于中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)。在哺乳類動物中,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元的細(xì)胞數(shù)量比例約為10:1。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞主要有星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞(與前者合稱為大膠質(zhì)細(xì)胞)和小膠質(zhì)細(xì)胞等。傳統(tǒng)認(rèn)為膠質(zhì)細(xì)胞屬于結(jié)締組織,其作用僅是連接和支持各種神經(jīng)成分,其實神經(jīng)膠質(zhì)還起著分配營養(yǎng)物質(zhì)、參與修復(fù)和吞噬的作用,在形態(tài)、化學(xué)特征和胚胎起源上都不同于普通結(jié)締組織。星形膠質(zhì)前體細(xì)胞主要表達Vimentin,而成熟之后表達Vimentin和膠質(zhì)纖酸性蛋白(GFAP),故GFAP被認(rèn)為是星形膠質(zhì)細(xì)胞成熟的標(biāo)志物。
方法簡介 實驗室分離的小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞采用消化法結(jié)合差速貼壁法篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實驗室分離的小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基
培養(yǎng)基: 小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液次
生長特性: 貼壁
細(xì)胞形態(tài): 梭形、多角形
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳2-3代左右
消化液: 0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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