商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 小鼠腎動脈內(nèi)皮細胞

組織來源 腎組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 小鼠腎動脈內(nèi)皮細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內(nèi)分泌的降解場所和腎外的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。腎動脈的分支為葉間動脈，穿行于腎柱內(nèi)，上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處，形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細血管，并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈，進入腎小囊后形成球形的毛細血管網(wǎng)，再匯集成出球小動脈，出腎小體。直小動脈分支形成毛細血管網(wǎng)，再匯合成直小靜脈，入弓狀靜脈、葉間靜脈，后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎，注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管，又是腎的機能血管，與腎泌尿機能密切相關(guān)。腎動脈在腎實質(zhì)內(nèi)形成兩個毛細血管網(wǎng)：腎小球毛細血管網(wǎng)，血壓較高，利于血漿濾過形成原尿；球后毛細血管網(wǎng)，血壓較低，利于腎小管的重吸收。腎動脈內(nèi)皮細胞是腎動脈的重要結(jié)構(gòu)細胞之，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈內(nèi)皮細胞主要功能有：①在血漿濾過形成原尿的過程中起重要作用，②在腎小管的重吸收過程中起重要作用，③保持和纖溶的動態(tài)平衡。

方法簡介 實驗室分離的小鼠腎動脈內(nèi)皮細胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實驗室分離的小鼠腎動脈內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、多聚-L-賴溶液（1×）或多聚-L-賴溶液（10×）或明膠包被液（1 mg/mL） 、PBS 、培養(yǎng)基

包被條件： PLL（0.1 mg/mL）或明膠（0.1%）

培養(yǎng)基： 小鼠腎動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態(tài)： 內(nèi)皮細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳2-3代

消化液： 0.25%

原代細胞培養(yǎng)步驟：

取材與預(yù)處理?：取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導(dǎo)致細胞死亡。

?細胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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