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產品a名稱 | 小鼠腎小球系膜細胞規格 | 英文名稱 | Mouse Glomerular Mesangial Cells |
產品規格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X7225 |
產品信息:

產品名稱 小鼠腎小球系膜細胞
組織來源 腎組織
產品規格 5×10^5Cells/T25
細胞簡介 小鼠腎小球系膜細胞分離自腎小球組織;腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內,微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球系膜是位于腎小球毛細血管袢之間的種特殊間充質,由系膜細胞和系膜基質組成。腎小球系膜細胞是腎小球內非常活躍的細胞,具有分泌細胞基質、產生細胞因子、吞噬和清除大分子物質及類似平滑肌細胞收縮的功能。腎小球系膜細胞增生和基質的過多產生是多種腎小球腎炎的主要病理表現。腎小球系膜細胞的培養是研究系膜擴張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。系膜細胞的主要作用可能有:①收縮作用,入球小動脈和出球動脈的收縮作用受系膜細胞的調節,以影響毛細血管袢的內壓和濾過率;②支持作用,它填充于毛細血管袢之間,支持毛細血管的位置;③吞噬作用,能吞噬被阻留在基膜內的大分子物質和蛋白質;④分泌腎素,在腎缺血或免疫復合物沉積時,系膜細胞增生且分泌腎素。
方法簡介 實驗室分離的小鼠腎小球系膜細胞采用機械研磨法結合不同孔徑不銹鋼網篩過濾后使用膠原酶消化制備而來,細胞總量約為5×10? cells/瓶。
質量檢測 實驗室分離的小鼠腎小球系膜細胞經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:

自備試劑: 0.25% 、 多聚-L-賴溶液(1×)或多聚-L-賴溶液(10×) 、PBS 、培養基
包被條件: PLL(0.1 mg/mL)
培養基: 小鼠腎小球系膜細胞培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液次
生長特性: 貼壁
細胞形態: 梭形、多角形
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳1-2代
消化液: 0.25%
原代細胞培養步驟:

取材與預處理?:取新生24小時內Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后重懸接種?。
?培養?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養基,37℃、5% CO?培養,24小時后換液?。
培養方法?:

原代細胞培養?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后接種于培養皿。
37℃、5% CO?培養,24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導致細胞死亡。
?細胞系培養?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養。
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