商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 小鼠子宮韌帶成纖細(xì)胞

組織來(lái)源 子宮組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細(xì)胞簡(jiǎn)介 小鼠子宮韌帶成纖細(xì)胞分離自子宮韌帶組織，子宮韌帶是子宮附件的部分，其主要功能是固定子宮，子宮韌帶共包括4條韌帶，分別是：子宮主韌帶、子宮闊韌帶、子宮圓韌帶、和骶子宮韌帶。子宮主韌帶為子宮闊韌帶下部?jī)蓪痈鼓ぶg的些纖結(jié)締組織束和平滑肌纖，較強(qiáng)韌，將子宮頸陰道上部連于骨盆側(cè)壁，它是持子宮頸正常位置，防止其向下脫垂的主要結(jié)構(gòu)。骶子宮韌帶由平滑肌和結(jié)締組織構(gòu)成，起自子宮頸陰道上部后面，向后繞過(guò)直腸的兩側(cè)，止于骶骨前面。此韌帶表面蓋以腹膜，形成弧形皺襞為直腸子宮襞。此韌帶向后上牽引子宮頸，并與子宮圓韌帶共同持子宮的前傾前屈位。子宮闊韌帶位于子宮兩側(cè)的雙層腹膜皺襞，呈翼狀，由覆蓋子宮前后壁的腹膜自子宮側(cè)緣向兩側(cè)延伸達(dá)盆壁而成，可限制子宮向兩側(cè)傾倒。闊韌帶分為前后兩葉，其上緣游離，內(nèi)2/3部包 裹輸卵管（傘部無(wú)腹膜遮蓋），外l/3部移行為骨盆漏斗韌帶（infundibulopelvic ligament）或稱卵巢懸韌帶（suspensory ligament of ovary），卵巢動(dòng)靜脈由此穿行。在輸卵管以下、卵巢附著處以上的闊韌帶稱輸卵管系膜，其中有結(jié)締組織及中腎管遺跡。卵巢與闊韌帶后葉相接處稱卵巢系膜。卵巢內(nèi)側(cè)與宮角之間的闊韌帶稍增厚稱卵巢固有韌帶或卵巢韌帶。在宮體兩側(cè)的闊韌帶中有豐富的血管、神經(jīng)、淋巴管及大量疏松結(jié)締組織稱宮旁組織。子宮動(dòng)靜脈和輸尿管均從闊韌帶 基底部穿過(guò)。子宮圓韌帶為對(duì)長(zhǎng)條狀圓索，由平滑肌和結(jié)締組織構(gòu)成。起于子宮外側(cè)緣，輸卵管子宮口的前下方。在子 宮闊韌帶前層覆蓋下，走向前外側(cè)，經(jīng)過(guò)腹股溝管，終止于陰阜及大陰 上部之中。為持子宮前傾位的主要結(jié)構(gòu)。

方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠子宮韌帶成纖細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠子宮韌帶成纖細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 小鼠子宮韌帶成纖細(xì)胞培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長(zhǎng)特性： 貼壁

細(xì)胞形態(tài)： 成纖細(xì)胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳2-3代左右

消化液： 0.25%

原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

取材與預(yù)處理?：取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無(wú)菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過(guò)濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時(shí)后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細(xì)胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過(guò)濾。

通過(guò)IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時(shí)后換液。

?注意事項(xiàng)?：消化時(shí)間需嚴(yán)格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過(guò)度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

?細(xì)胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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