技術文章
TECHNICAL ARTICLES近期根據(jù)經(jīng)驗總結了細胞株分離培養(yǎng)的2個關鍵因素。1、組織的活性:如果我們取的都是壞死的組織或者結締組織,我相信任何方法都不可能分離出來活的細胞的。另外,取完的組織要冷藏存放,并且越早分離越好,在24h內,zui久不要超過48h。2、組織的消化:在組織消化前,組織剪的越碎越好(1mm3左右為宜),細胞株組織的大小決定了組織的消化時間,不同組織消化時間差別較大:例如肺癌在2h-2.5h;食管癌在1個多小時。四lv對苯二甲suan標準品1000mg/L于甲醇,1ml丁草胺CDGG-...
在進行腫瘤細胞分選前,保留一小部分起始樣本是非常重要的。這樣有助于評估分選前樣品中目標細胞的比率及分選后該細胞的回收率。各種組織和細胞來源中的細胞比率可以根據(jù)已發(fā)表的數(shù)據(jù)來估算。然而,實際操作中,細胞比率可能因供體而異,并且取決于是否來自正常的、患病的還是轉基因的樣本。細胞回收率:計算分選后的細胞回收率是評估實驗是否成功的寶貴工具。需要準確地得到以下四個數(shù)據(jù):分選前起始樣本中的細胞總數(shù)*目標細胞在起始樣本中的比率*分選后的細胞總數(shù)分選后目標細胞的純度使用以下公式計算細胞回收率...
細胞系自然分化生成特定細胞的過程由轉錄因子控制,這些轉錄因子直接控制了基因表達。因此該研究團隊系統(tǒng)地研究了不同的轉錄因子組合對干細胞分化為GABA分泌神經(jīng)元的影響。zui終他們發(fā)現(xiàn)了三種關鍵的轉錄因子,通過優(yōu)化的實驗方法,他們只需要35天就可以將超過90%的干細胞轉化為GABA分泌神經(jīng)元。就連Sun本人都對這一實驗結果感到震驚:“這些誘導出來的細胞就像真正成熟的神經(jīng)元一樣。”他和他的同事在這些細胞中發(fā)現(xiàn)了不同亞型的GABA分泌神經(jīng)元,它們的分子及電生理學特征與自然發(fā)育的神經(jīng)元...
原代細胞實驗需要注意以下幾點:1、DNA的量:Lipofectamine2000=1:2~32、細胞密度大約占培養(yǎng)板的80%左右,轉染。3、轉染期間不要加抗生素,否則會導致細胞死亡。步驟如下:以24孔培養(yǎng)板為例1、轉染前一天細胞換新的培養(yǎng)基2、制備DNA-Lipofectamine2000復合物,如下:a、用50ul無血清培養(yǎng)基稀釋DNA(0.8g),輕輕混勻;b、Lipofectamine2000使用前,輕輕混勻,用48ul無血清培養(yǎng)基稀釋2ulLipofectamine2...
腫瘤細胞廣泛存在于自然界中,幾乎所有的油脂中都含有數(shù)量不等的軟脂酸組分。中國產(chǎn)的烏桕種子的烏桕油中,軟脂酸的含量可高達60%以上,棕櫚油中含量大約為40%,菜油中的含量則不足2%。分子結構數(shù)據(jù)1、摩爾折射率:77.732、摩爾體積(m3/mol):287.33、等張比容(90.2K):690.54、表面張力(dyne/cm):33.35、腫瘤細胞極化率(10-24cm3):30.81200mg130372-200301乙酰吉它霉素效價測定100mg130375-200701制...
腫瘤細胞衍生的神經(jīng)元移植后,小鼠表現(xiàn)出恢復,而細胞仍然成長為它們*成熟的形式,這項研究類似于2013年加州大學舊金山分校發(fā)表的一項研究,當時科學家將胎兒小鼠的腦細胞移植到癲癇小鼠中。雖然這些研究結果鼓舞人心,但是Chung指出,還需要一個過程來純化神經(jīng)元,所以只有那些已知抑制癲癇發(fā)作的神經(jīng)元(稱為中間神經(jīng)元)才能被移植,在考慮用于人類治療之前,需要完成進一步的靈長類動物研究。“因為胚胎干細胞能夠分化成多種不同的細胞類型,甚至當我們將它們轉化為神經(jīng)元時,總是還會有其他類型的細胞...
培養(yǎng)人類胚胎腫瘤細胞的研究者們發(fā)現(xiàn),核型正常的細胞在植板(plating)之后只有少數(shù)能夠分裂,而且它們的子細胞還會出現(xiàn)持續(xù)性的死亡,很少能形成可以長期增殖的克隆。Sheffield大學的PeterAndrews教授和DanielCoca教授領導研究團隊,對單個人類胚胎干細胞進行了延時成像,并由此鑒定了限制干細胞生長的主要瓶頸。研究顯示,在長期培養(yǎng)過程中發(fā)生了適應性突變的干細胞,受到的生長限制有所緩解,能夠進行更有效的擴增。Sheffield大學的DrIvanaBarbari...
腫瘤細胞的DNA損傷修復能力是決定其基因組穩(wěn)定性的重要因素。在所有類型的DNA損傷中,DNA雙鏈斷裂是zui為嚴重的一種。因此細胞進化出了兩條修復通路:非同源末端連接(NonhomologousEndJoing,NHEJ)和同源重組(HomologousRecombination,HR)來修復這類DNA損傷。在這項研究中,研究人員利用年輕和年老組小鼠的皮膚細胞誘導成iPS細胞系,發(fā)現(xiàn)年老組iPS細胞的基因組穩(wěn)定性下降,NHEJ修復能力下降,但HR修復能力不變。在對NHEJ通路...
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