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NEWS INFORMATION原代細胞在再生醫(yī)學中的應(yīng)用前景巨大,遺傳物質(zhì)穩(wěn)定是其安全應(yīng)用的前提。和分化細胞相比,干細胞的細胞周期短,DNA復制頻繁,且細胞周期中G1期十分短暫,并缺乏G1細胞周期檢查點,這些特征使干細胞在DNA復制中面臨巨大的復制壓力。復制壓力是內(nèi)源性DNA損傷和基因組不穩(wěn)定的主要來源,有效處理復制壓力是細胞維持遺傳物質(zhì)穩(wěn)定性的重要途徑。目前,干細胞如何有效處理復制壓力尚不清楚。鄭萍課題組研究了多能干細胞對DNA復制壓力的處理能力及分子機制。通過系統(tǒng)比較小鼠胚胎干細胞和不同類型的快速分裂...
腫瘤細胞毒性的入門級指標是細胞活力。判斷一種物質(zhì)(化合物、小分子藥物或蛋白質(zhì)等)對細胞的毒性首先要觀察的是其是否或誘導細胞死亡,即細胞活力的變化。以維生素C為例,研究發(fā)現(xiàn),高濃度維生素C對眼癌細胞Y79RetinoblastomaCells具有殺傷作用。文章中,作者以眼癌常用化療藥Melphalan作為對照,對經(jīng)過處理的細胞活性進行檢測,發(fā)現(xiàn),隨著濃度的升高,維生素C對Y79RetinoblastomaCells殺傷作用逐漸增強,并且維生素C對眼癌細胞的殺傷作用優(yōu)于Melph...
原代細胞抑制骨髓造血被作為教科書般的常識。周波等的工作發(fā)現(xiàn),骨髓脂肪細胞能夠通過分泌造血干細胞必須生長因子SCF促進放化療后造血干細胞的再生。利用條件性敲除技術(shù)將Scf從骨髓脂肪細胞中敲除,會導致放化療后造血干細胞再生的缺陷,進而降低小鼠的血氧水平和生存率。周波等的前期工作顯示,在生理條件下,內(nèi)皮細胞和血管外周的間充質(zhì)干細胞是造血干細胞巢(niche)的核心組分,它們通過結(jié)構(gòu)性或功能性的機制促進造血干細胞的自我更新。在zui近的這項研究中,研究人員發(fā)現(xiàn)放療或化療之后生理性的造...
1.原代細胞不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)其實燒...
原代細胞通過給機體補充抗氧化劑就能夠保護機體抵御氧化性壓力帶來的損傷。研究者Beelman說道,關(guān)于衰老的自由基理論已經(jīng)存在很長一段時間了,當我們對食物氧化產(chǎn)生能量時就會產(chǎn)生一些自由基(副產(chǎn)物),其中很多副產(chǎn)物都有毒性,而機體擁有很多能夠控制自由基的重要機制,比如氧化劑等,但足夠多的自由基才會誘發(fā)機體損傷,而這些損傷常常和多種老化疾病直接相關(guān),比如癌癥、冠心病和阿爾茲海默病等。研究者發(fā)現(xiàn),牛肝菌中含有的麥角硫因和谷胱甘肽的水平zui高,牛肝菌在意大利非常流行,因為意大利全國把...
細胞株的評定需要從環(huán)境方面出發(fā),首先是需要有高溫的穩(wěn)定環(huán)境才可以,一般就是指在液氮當中,不過,從中的溫度大概是-180攝氏度,液氮的保護下相對來說是比較穩(wěn)定的,因此在保存的時候,定期倒掉液氮就可以了,而且液氮罐體想要破碎的話,風險是比較小的,當然了,也是會有-150攝氏度以下的一些冰箱,但是這個就要求保證一定的電力以及報警的能力,一般來說難度就要比液氮要高很多了。細胞庫既然是一個儲存細胞的倉庫,里面就會有各種各樣不同種類以及性狀的細胞,因此在儲存的時候都是要根據(jù)細胞的種類以及...
1.原代細胞抗原的密度①高表達的抗原可選擇幾乎所有的熒光素;②低密度表達的抗原需要可提供較高S/N比值的熒光素如PE/APC。2.自發(fā)熒光①每種細胞群都有不同水平的自發(fā)熒光;②所有的熒光通道均可觀察到自發(fā)熒光,但自發(fā)熒光強度在波長較長時迅速降低;③對自發(fā)熒光較強的細胞,選擇發(fā)射波長較長的熒光素(如APC)可得到較好的S/N比值;④對自發(fā)熒光比較弱的細胞,發(fā)射波長較長的熒光素對S/N提高沒有明顯的改善??蛇x用FITC。3.非特異結(jié)合①許多熒光抗體可產(chǎn)生低水平的非特異結(jié)合,使陰性...
1.腫瘤細胞目標長度為18–30個核苷酸。2.嘗試將熔解溫度限制在55至65?C,溫度相差小于5?C。3.如果引物的Tm值較低,則尋找G和C含量更高的序列,或者稍微延長引物的長度。4.GC的目標含量為40-60%,3’端的C或G可促進結(jié)合。5.一般在引物的5’限制性位點處添加3-4個核苷酸,以實現(xiàn)切割。6.避免二級結(jié)構(gòu)區(qū),富含GC和富含AT的結(jié)構(gòu)域應(yīng)分布均衡。7.避開連續(xù)四個或更多的同一堿基重復或二核苷酸重復。8.避免引物之間的互補(引物內(nèi)有超過三個堿基互補)或引物內(nèi)部形成互...
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