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CRISPR-Cas9聯手腫瘤細胞培養

腫瘤細胞用RNA指導的CRISPR-Cas9系統能夠的切割掉特定位置的DNA，避免了傳統RNAi技術中出現的不能*敲除既定基因或者脫靶效應問題。利用該項技術，不僅能夠實現*敲除細胞既定基因的目的，還能夠隨意改變細胞核苷酸的序列，甚至能夠編輯原代鼠源細胞的基因組。因此，利用CRISPR-Cas9系統靶向敲除原代人源細胞特定基因，為人類多種疾病中某個或者多個基因功能的研究，進一步確定致病的分子機制提供了一個十分強大的研究途徑。然而，由于原代上皮細胞自身具有較低的轉染效率，而用傳統...

原代細胞 凍存及復蘇

為了保存原代細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度—－196℃，將細胞收集至凍存管中加入含保護劑（一般為二甲亞砜或甘油）的培養基，以一定的冷卻速度凍存，zui終保存于液氮中。在極低的溫度下，細胞保存的時間幾乎是無限的。復蘇一般采用快融方法，即從液氮中取出凍存管后，立即放入37℃水中，使之在一分鐘內迅速融解。然后將細胞轉入培養器皿中進行培養。凍存過程中保護劑的選用、細胞密度、降溫速度及復蘇時溫度、融化速度等都對細胞活力有影響。將取得的...

腫瘤細胞狀態不好的解決方法

腫瘤細胞是生物體形態結構和生命活動的基本單位。通常認為細胞是人體的zui小單位，它是由許多更小的具有自身功能的結構組成。盡管人類細胞大小不等，但所有的細胞均很小。即使是zui大的細胞如受精卵，也是肉眼所不能見到的。細胞狀態不好，可能是血清中有黑膠蟲。解決方法如下：1.換好一點的血清。2.用無菌的PBS洗幾次，可一定程度上緩解。注意好實驗環境要，保持細胞間整個環境的潔凈度。3.換用進口的一次性塑料培養瓶。4.建議清理無菌室所有物品，重新滅菌，用KMnO4熏蒸，按使用無菌室做，細...

原代細胞的類型及解決方法

原代細胞細菌污染細胞中如果污染細菌，zui常見的有枯草桿菌等革蘭陽性菌以及大腸桿菌、假單孢菌等革蘭陰性菌，其中又以白色葡萄球菌較常見。培養細胞受細菌污染后，會很快出現培養液變混濁，pH改變。也有少數培養液肉眼觀察無多少改變，只能在鏡下發現菌體才知污染。所以，每天應仔細觀察。污染后細胞發生病理改變，胞內顆粒增多、增粗，zui后變圓脫落死亡，造成實驗失敗和細胞株(系)丟失。細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據感染細菌的不同，可有不同的外形，培養液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響...

一項讓原代細胞發光的新技術

在原代細胞本研究中，他們結合了50位手術切除肺結節患者的PET成像和IMI。所有的患者在他們的手術前的30天內接受手術前PET掃描。這些掃描共識別66個結節。在操作過程中，IMI能夠鑒別出66個先前已知的結節中的60個，有效率91％。此外，醫生們用IMI，確定出了此前由PET掃描或傳統術中監測未被發現另外9個結節。PET和IMI之間，總共有75個結節得到了鑒定。研究人員發現，對于其中的結節是否是癌癥PET準確確認其中的51例（68％）。相比之下，IMI能夠準確發現68例（91...

原代細胞發現“抑郁“是一種傳染病

原代細胞發現抑郁癥的產生其實是受到了自身炎癥反應的影響。另一部分學者甚至認為，這一影響的罪魁禍首就是病原體。研究人員以小鼠為研究對象設計了如下實驗：他們若干只老鼠分別與一只體型巨大，兇狠的同類小鼠關在同個籠子里，并且發生身體接觸。每天大約十分鐘的接觸時間，持續十天。之后，他們發現其中一部分小鼠明顯產生抑郁的癥狀：不想進食。之后，研究者們神奇地發現這些產生抑郁癥狀的個體血清中IL-6(一類炎癥反應因子)的濃度明顯高于正常的個體。研究者認為正是這些炎癥反應促成了小鼠抑郁的癥狀。打...

干細胞與感冒病毒結合

近日，來自西北大學的科學家開發了*神經干細胞療法，這種療法運用干細胞和感冒病毒相互配合，共同尋找并消滅致命腦癌—惡性神經膠質瘤，目前*階段的臨床試驗已經成功，不僅如此，實驗證明這種藥物組合對于臭名昭著的惡性神經膠質瘤效果不錯，并已經得到美國食品藥品管理局作為試驗藥物的批準。這種新奇的藥物組合是通過干細胞來輸送感冒病毒到病灶位置，這種感冒病毒通常是引起普通感冒或其他腺病毒的來源，兩者結合在一起，與化療和放療共同作用來消滅癌細胞。來自西北大學的研究人員表示：“我們發現，當干細胞與...

原代細胞自食的新型分子機制

當一種原代細胞圍繞、殺滅并且消化另外一種細胞時就會發生細胞自食現象，這種現象并不會在健康細胞之間發生，但在腫瘤組織中卻非常常見，這項研究中，研究人員揭示了細胞分裂驅動細胞自食發生的機制，即當細胞一分為二時；由于失控的細胞分裂是癌癥發生的標志，因此研究人員認為細胞自食往往在抵御癌癥上發揮著重要的角色。文章中，研究人員對人類上皮細胞進行了研究，這些細胞能夠形成機體表面，并且引起超過80%的人類癌癥，正常情況下，當細胞分裂時上皮細胞會牢固地吸附在其周圍表面上，本文研究發現，吸附力的...