細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：大鼠骨髓瘤細(xì)胞;IR983F

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9875

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。

WNK4/FITC 熒光素標(biāo)記一種新的絲/蘇激酶家族成員的基因WNK4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CLDN1(Claudin 1)C-term 緊密連接蛋白1抗原(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗體  ACE2 0.1ml

phospho-14-3-3 beta + zeta (Ser186) 英文名稱： 磷酸化14-3-3 β/ζ抗體 0.1ml

Phospho-EEF2 (Thr56 + Thr58) 英文名稱： 磷酸化真核翻譯延長因子2抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Filamin A/FLNA (Ser2151) 磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體 規(guī)格 0.1ml

CLDN1(Claudin 1)C-term 緊密連接蛋白1抗原(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

TM(Thrombomodulin) 血栓調(diào)節(jié)蛋白多肽Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 CACH2/CaV1.2 L型鈣通道蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Pdk4 丙酮酸脫氫酶激酶4抗體 規(guī)格 0.1ml

Calcitonin (CT)降鈣素 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

Tenascin C 英文名稱： 細(xì)胞粘合素(固生蛋白)抗體 0.1ml

CENPA 英文名稱： 著絲粒蛋白A 0.1ml

 CACH2/CaV1.2 L型鈣通道蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Goat  rabbit IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml

Phospho-FLT3 (Tyr599) 英文名稱： 磷酸化FMS樣酪酸激酶3抗體 0.1ml

促卵泡刺受體抗體  FSH-R 0.2ml

 PAK1/FITC 熒光素標(biāo)記p21激活激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-STAT1 (Ser727) 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat  Mouse IgM 羊抗小鼠IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
大鼠骨髓瘤細(xì)胞;IR983F凍切片細(xì)胞有絲分裂熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次大鼠表皮生長因子受體（EGFR）ELISA試劑盒,

石蠟切片細(xì)胞細(xì)胞有絲分裂熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次大鼠鈣調(diào)磷酸酶（CaN）ELISA試劑盒,

載玻片細(xì)胞有絲分裂NBT顯色檢測試劑盒10/20次大鼠胰島素自身抗體（IAA）ELISA試劑盒,

凍切片細(xì)胞有絲分裂NBT顯色檢測試劑盒10/20次大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類（MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ）ELISA試劑盒,

石蠟切片細(xì)胞有絲分裂NBT顯色檢測試劑盒10/20次豬超氧化物歧化酶（SOD）ELISA試劑盒,

簡易細(xì)胞核形態(tài)染色試劑專題雞熱休克蛋白20（HSP-20）ELISA試劑盒,

名稱規(guī)格雞腎上腺髓質(zhì)素（ADM）ELISA試劑盒,

HOECHST33342簡易細(xì)胞核形態(tài)染色試劑盒100次雞血小板因子4（PF-4/CXCL4）ELISA試劑盒,

HOECHST33342/PI簡易細(xì)胞核形態(tài)染色試劑盒100次雞層連蛋白/板層素（LN）ELISA試劑盒,

吖啶橙簡易細(xì)胞核形態(tài)染色試劑盒100次鴨主要組織相容性復(fù)合體（MHC）ELISA試劑盒,

PROPIDIUM IODIDE簡易細(xì)胞核形態(tài)染色試劑盒100次綿羊白介素1β（IL-1β）ELISA試劑盒,

DAPI簡易細(xì)胞核形態(tài)染色試劑盒100次兔子白介素1可溶性受體I （IL-1sR Ⅰ）ELISA試劑盒,

ETHIDIME BROMIDE簡易細(xì)胞核形態(tài)染色試劑盒100次兔子E選擇素（E-Selectin/CD62E）ELISA試劑盒,

羅丹明123簡易細(xì)胞核外形態(tài)染色試劑盒100次兔半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C（Cys-C）ELISA試劑盒,

HOECHST33258簡易細(xì)胞核形態(tài)染色試劑盒100次兔子白介素8（IL-8/CXCL8）ELISA試劑盒,