產品名稱：視網膜上皮細胞;ARPE-19

規格：1×10?cells/T25培養瓶
貨號：YS-02X9535

細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。

3)經鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣，不規則細胞，貼壁培養。

細胞培養步驟

一．培養基及培養凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養基；優質胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態，細胞最好在對數生長期，細胞密度適合，剛剛發生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節約處就節約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關于“慢凍"，傳統的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內裝異丙醇，在-80度并內可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

Proteasome 20S LMP7 /FITC 熒光素標記低分子質量蛋白7抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rabbit  MK IgM Whole serum 兔抗猴IgM抗血清Multi-class antibodies規格： 1ml

白介素2抗體  IL-2 0.1ml

Rabbit  human IgM whole serum 兔抗人IgM抗血清 1ml

FBXO2 英文名稱： F-box蛋白2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PTEN(Ser380/Thr382/Thr383) 磷酸化抑制基因PTEN抗體 規格 0.1ml

Rabbit  MK IgM Whole serum 兔抗猴IgM抗血清Multi-class antibodies規格： 1ml

LIF peptide 白血病抑制因子抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg

 Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烴受體抗體Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CaM I (Ser 101) 磷酸化鈣調節素抗體 規格 0.1ml

過氧化物酶阻斷劑A 10ml 推薦用于凍切片,孵育20-30分鐘.

VNN2 英文名稱： 血管非炎性蛋白2抗體 0.2ml

DHCR7 英文名稱： 7脫氫膽固醇還原酶抗體 0.2ml

 Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烴受體抗體Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Slit1 英文名稱： 多重表皮生長因子樣蛋白4抗體 0.2ml

EAAT1 英文名稱： 膠質細胞谷酸運載蛋白1抗體 0.1ml

半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體(人)  Caspase-12 0.1ml

 Phospho-TNK1 (Tyr277)/FITC 熒光素標記磷酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-HSF1(Ser303) 磷酸化熱休克因子1抗體 規格 0.2ml

MIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha) 巨噬細胞炎性蛋白3α抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg
視網膜上皮細胞;ARPE-19(R)-(-)-2-苯酸(>98.0%(GC)(T))亥茅酚苷環境無機磷/游離磷酸根離子比色法定量檢測試劑盒

 (R)-(-)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙(>99.0%(GC))人參皂苷 Rb2多巴（dopamine）比色法定量檢測試劑盒

(S)-(+)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙(>99.0%(GC))1,5-O-二咖啡酰奎寧酸組織多巴（dopamine）比色法定量檢測試劑盒

2,3,4,6--O-苯甲酰基-β-D-吡喃葡萄糖基異硫酸酯(>98.0%(HPLC))白屈菜紅堿體液多巴（dopamine）比色法定量檢測試劑盒

N-(2-羧基苯甲酰)-(-)-10,2-樟腦磺內酰(>98.0%(HPLC)(T))人參皂苷 Rf半乳糖總含量酶連續循環反應比色法定量檢測試劑盒

N-(2-羧基-4,5-二氯苯甲酰)-(-)-10,2-樟腦磺內酰(>98.0%(HPLC)(T))木犀草苷組織半乳糖總含量酶連續循環反應比色法定量檢測試劑盒

對茴香酸(>99.0%(GC)(T))冬凌草甲素血濾紙片樣品半乳糖總含量酶連續循環反應比色法定量檢測試劑盒

9-蒽羧酸(>97.0%(GC)(T))地膚子皂苷 Ic體液半乳糖總含量酶連續循環反應比色法定量檢測試劑盒

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據不同的菌類和用途，選擇適宜的培養基，培養基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養基各種成分放入容器內，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節pH值到適宜范圍內。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細胞*培養基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內（試管內每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準備滅菌。

（五）滅菌：培養基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。