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原代細(xì)胞
兔原代細(xì)胞
YS-01X7185兔腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)





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ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 兔腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | 英文名稱 | Rabbit Intestinal Artery Endothelial Cells |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X7185 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 兔腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源 腸組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡介 兔腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自腸系膜動脈組織;腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)的微生態(tài)系統(tǒng)。腸系膜動脈由背大動脈發(fā)出的走行在腸系膜內(nèi),分布于消化管的動脈。分成腸系膜上動脈和腸系膜下動脈。前者主要分布于小腸左側(cè),后者分布于結(jié)腸、大腸、泄殖腔等處。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細(xì)胞,由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至小的微血管。
方法簡介 實驗室分離的兔腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、多聚-L-賴溶液(1×)[PB180522]或多聚-L-賴溶液(10×)[PB180523]或明膠包被液(1 mg/mL) 、PBS 、培養(yǎng)基
包被條件: PLL(0.1 mg/mL)或明膠(0.1%)
培養(yǎng)基: 兔腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞 培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液一次
生長特性: 貼壁
細(xì)胞形態(tài): 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳1-3代
消化液: 0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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