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原代細胞培養技術及hanks液的配制

細胞生物學生物大實驗的時候有關動物細胞培養的大實驗，在這里詳細介紹了細胞培養中各種器皿的清晰和滅菌、培養基的配制、hanks液/d-hanks液等試劑的配制、細胞的傳代培養及其凍存與復蘇方法與操作步驟。原代細胞培養是用無菌操作的方法將動物體內的組織(或器官)取出，模擬動物體內的生理條件，在體外進行培養.使其不斷地生長、繁殖，人們借以觀察細胞的生長、繁殖、細胞分化以及細胞衰老等過程的生命現象。細胞培養的突出優點，一是便于研究各種物理、化學等外界因素對細胞生長發育和分化等的影響;...

原代細胞的基本結構及作用？

與其他系統一樣，原代細胞同樣有邊界，有分工合作的若干組分，有信息中心對細胞的代謝和遺傳進行調控。細胞的結構復雜而精巧，各種結構組分配合協調，使生命活動能夠在變化的環境中自我調控、高度有序地進行。1.細胞壁（CellWall）【動物細胞沒有】位于植物細胞的zui外層,是一層透明的薄壁。它主要是由纖維素和果膠組成的，孔隙較大，物質分子可以自由透過。細胞壁對細胞起著支持和保護的作用。2.細胞膜（CellMembrane)細胞壁的內側緊貼著一層極薄的膜，叫做細胞膜。這層由蛋白質分子和...

原代細胞治療可緩解眼壓降低青光眼

研究人員將新生原代細胞注射到青光眼小鼠模型的眼內，發現新細胞的流入能夠幫助小梁網狀結構再生，該結構是眼部的一個排水管道能夠幫助避免出現液體累積，如果液體在眼睛里累積會使眼壓升高容易導致青光眼。這種疾病會損傷視神經，可能導致失明。"我們認為用健康細胞替代損傷或缺失的小梁網狀細胞能夠重新恢復小梁網狀結構的功能。"文章作者Kuehn在他們實驗室的上這樣寫道。相關研究結果發表在學術期刊PNAS上。這種方法的一個潛在優勢就是利用病人自身皮膚細胞獲得誘導多能干細胞，這樣就能避開使用胎兒干...

誘導性細胞系可以定向分化嗎

日本學者山中伸彌將oct4、Sox2、Klf4、c-myc四個基因插入到成體細胞系DNA中重編程細胞恢復到胚胎干細胞狀態，由此建立了iPS細胞。這些細胞可以向胚胎干細胞一樣，轉變為幾乎所有的組織類型。為此,山中伸彌在2011年獲得諾貝爾獎。雖然iPS細胞有潛力發育為任何組織器官，但如何誘導它們往正確的方向分化問題尚未解決。由中科院上海生命科學院/上海交大醫學院健康科學研究所金穎教授帶隊的關于“基于誘導多能干細胞技術的若干重大疾病模型與機理研究”的“973”科技部重大科學研究項...

原代細胞如何抵抗粘膜系統二次感染？

原代細胞是機體T淋巴細胞中的一個特殊亞群，它們在淋巴組織中的比例很低，但富集于上皮粘膜系統，比如皮膚，呼吸道，腸道以及道等等。這類細胞是T細胞分化過程中形成的細胞，在胚胎發育為新生個體的過程中會逐步地向各組織遷移。其中，TCR中保守的γ鏈對于γδT細胞的遷移以及功能的實現都十分關鍵。不過，新的證據表明γδT細胞的功能，主要是IL-17的表達，可能是在其離開胸腺的時候分化產生的，而γ鏈的表達與否并不重要。不管怎樣，于γδT細胞從我們出生開始就分布在各個表皮粘膜層中，從而能夠抵抗...

構建人類原始原代細胞

這是*次成功將人類原代細胞編程至這樣的早期發育階段。這項研究有可能幫助找到有關一些生育問題病因的答案，生成關于胚胎發育zui早期的一些新見解，并有潛力在未來促使開發出新型的生殖技術。多年來研究人員一直試圖在培養皿中構建出人類原始生殖細胞。原始生殖細胞生成于胚胎發育的zui初幾個星期里，此時受精卵中的胚胎干細胞開始分化為這一非常基礎的細胞類型。一旦這些原始生殖細胞變為‘特化’細胞，它們會‘幾乎自發’地繼續朝著精子或卵子前體細胞發育。誘導多能干(iPS)細胞的誕生促使科學家們提出...

腫瘤細胞培養成纖維細胞排除法

腫瘤細胞刮除法：是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭（用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲）、或裹少許脫脂棉制成，裝入試管中高壓滅菌后備用（也可用特制電熱燒灼器刮除）。刮除程序為：（1）標記：鏡下觀察，用不脫色筆在培養瓶皿的背面圈下生長腫瘤細胞的部位；（2）刮除：棄掉培養液，把無菌膠刮伸入瓶皿中，肉眼或顯微鏡窺視下，刮除無標記空間；（3）用Hanks液沖洗一兩次，洗除被刮掉的細胞；（4）注入培養液繼續培養，如發現仍有成纖維細胞殘留，可重復刮除至*除掉為止2．反復貼壁法：根據腫瘤細胞比成纖維細...

正確復蘇原代細胞的方法

原代細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢?沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態檢查的作用何在?請看下文：活力檢查–千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染，如果發現有污染毫不猶豫的丟棄!形態檢查–檢查細胞的固有形態和生長行為。凍存細胞：補充新的培養液–在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養液。在細胞長至70%單層時收獲細胞，計數活細胞數，用凍存液調整細胞密度~5x106cells/ml(根據不同的細胞類型調整)凍存液–用凍...