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ATCC細(xì)胞株解凍和培養(yǎng)操作推薦

凍存的ATCC細(xì)胞株和雜交腐細(xì)胞株在運(yùn)送過程中使用干冰保持低溫。收到細(xì)胞后，可以立即解凍復(fù)蘇，去除二甲基亞砜（DSMO0）后進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。如果不立即復(fù)蘇培養(yǎng)細(xì)胞，必須將細(xì)胞凍存管放置于液氮罐氣相層儲存。請不要將細(xì)胞存儲在-130℃以上的溫度。如果溫度不夠低，達(dá)不到-130℃，細(xì)胞活力會立即下降。ATCC細(xì)胞株產(chǎn)品附帶一份產(chǎn)品資料單，其中包含細(xì)胞株的信息和詳細(xì)的操作指南。細(xì)胞株的所有詳細(xì)介紹可以在ATCC找到，產(chǎn)品資料單也可以在ATCC下載。此外產(chǎn)品還附帶細(xì)胞株具體批次的檢測報...

原代細(xì)胞保存的主要方法之一細(xì)胞凍存

利用凍存技術(shù)將原代細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外，還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5％．15％的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點(diǎn)降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細(xì)胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細(xì)...

原代細(xì)胞培養(yǎng)基的保存方法分析

原代細(xì)胞培養(yǎng)基的保存方法分析1.干粉，買了后一定要保存在4度。有人保存在-20度我認(rèn)為沒有必要。但4度是非常必要的。保證期是有提示的。2.配好的無血清培養(yǎng)基一定保存在4度，保存不要超過3個月。用時根據(jù)提示要加入谷胺酰胺。3.加入血清的培養(yǎng)基，保存在4度不要超過1個月，從時間太長，活性下降。當(dāng)然稍微長點(diǎn)也不一定出問題。但是根據(jù)細(xì)胞而定;如果原代培養(yǎng)，新鮮，如果是原代細(xì)胞，或僅維持傳代就不太要緊。但是原則是越新越好。786-O[786-0],人腎透明腺癌細(xì)胞HumanHEC-1A...

原代細(xì)胞如何消除組織培養(yǎng)的污染

原代細(xì)胞當(dāng)重要的培養(yǎng)污染時，研究者可能試圖消除或控制污染。首先，確定污染物是細(xì)菌、真菌、支原體或酵母，把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開，用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺，檢查HEPA過濾器。高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細(xì)胞系有毒性，因而，做劑量反應(yīng)實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點(diǎn)在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟。①在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細(xì)胞，稀釋到常規(guī)原代細(xì)胞傳代的濃度。...

哪些方法可以使細(xì)胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基

1．細(xì)胞株直接適應(yīng)法式—將細(xì)胞直接從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到無血清培養(yǎng)基中。2．連續(xù)適應(yīng)或循序隔絕法—分幾步將細(xì)胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到無血清培養(yǎng)基中。與直接適應(yīng)法相比較，連續(xù)適應(yīng)法對于細(xì)胞更溫和些。為了使細(xì)胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基，關(guān)鍵是細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)滿足以下條件：1．處于對數(shù)生長中期2．存活率大于90%3．在適應(yīng)期間，以較高的初始細(xì)胞株接種量進(jìn)行接種下面列出了常規(guī)適應(yīng)步驟。初始細(xì)胞接種量、細(xì)胞產(chǎn)量和培養(yǎng)周期是連續(xù)優(yōu)化的良好開端。直接適應(yīng)有些類型的細(xì)胞可以直接從含有血清培養(yǎng)基適應(yīng)無血...

干細(xì)胞過濾器的產(chǎn)品優(yōu)勢

干細(xì)胞過濾器是一種用于細(xì)胞過濾和分離的微流體器件。本產(chǎn)品由一個封閉的流體通道作為細(xì)胞過濾器腔體，1、在細(xì)胞過濾器腔體的兩端設(shè)有流體的輸入端口；2、和流體輸出端口；3、在流體的輸入端口和流體輸出端口之間設(shè)置細(xì)胞過濾裝置即細(xì)胞顆粒阻擋器；4、在細(xì)胞顆粒阻擋器旁為流體池；5、細(xì)胞阻擋結(jié)構(gòu)可阻擋流體中較大的細(xì)胞，并使之聚集在流體池中，并被流體池中的相關(guān)抗體所捕獲。通過外加的物理或化學(xué)作用，使其破碎或滅活，達(dá)到細(xì)胞過濾的作用。干細(xì)胞產(chǎn)品說明：尼龍網(wǎng)格大小為40微米、70微米以及100微...

不同細(xì)胞培養(yǎng)基的除菌方式及注意事項

細(xì)胞系培養(yǎng)基滅菌的方式分為高壓滅菌和膜過濾除菌，不同的培養(yǎng)基由于其營養(yǎng)成份不同，滅菌方式也可能不同。絕大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)基不適宜高壓滅菌。因為高壓滅菌易破壞細(xì)胞培養(yǎng)基中的一些成份，如某些維生素等，因此，在通常的高壓滅菌型細(xì)胞培養(yǎng)基中，配方中的維生素種類與過濾型培養(yǎng)基相比較少，對于細(xì)胞系生長*的谷氨酰胺等，需待高壓后補(bǔ)充到培養(yǎng)基中。在高壓過程中，滅菌用器皿的選擇應(yīng)注意避免蒸發(fā)或是污染。在大規(guī)模工業(yè)化中，可以采用短時超高溫處理的方法進(jìn)行流水線式的滅菌，能夠提高自動化效率，降低成本。膜...

人外周T細(xì)胞的分離與鑒定

材料：淋巴細(xì)胞株懸液、1%SRBC懸液、滅活之小牛血清、離心管、試管、吸管、載玻片、0.8%戊二醛、瑞氏染液。方法（1）取上述配好之淋巴細(xì)胞懸液0.1ml于潔凈小試管中，加入1%SRBC懸液0.1ml。再加入小牛血清0.1ml，混勻，置37℃水浴箱中5分鐘，500轉(zhuǎn)/分，離心5分鐘，放4℃冰箱2-24小時。（2）從冰箱中取出試管，留適量上清液，輕輕搖勻，加0.8%戊二醛2滴，輕搖后，置4℃冰箱15分鐘，取出，作成涂片，待自然干燥，以瑞氏染液染色。（3）計數(shù)：鏡下觀察，凡結(jié)合三...